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攻克扩增难题高GC含量,复杂二级机构,长片段的终极方案

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2026-08-11

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做PCR最怕什么?模板GC含量高非常难打开,二级结构复杂怎么都扩不出,或者片段太长跑出一条弱带甚至什么都没有——这些场景遇上一个就够头疼了。

Hieff Canace® Veritas Long PCR Master Mix(10166ES) 就是为这些"困难户"量身打造的终极方案。

🎯三大硬核能力,专治疑难模板

🔥 长片段:DNA 40 kb / cDNA 14 kb

普通Taq酶扩个3-5 kb已经吃力,Veritas用 5-10秒/kb 的延伸速度直接推到40 kb(DNA模板),cDNA也能轻松上14 kb。速度够快,模板还没形成二级结构就已经扩完了。

 

最长可扩增40kb片段。以50 ng人基因组DNA为模板,扩增1-40 kb片段,Hieff Canace® Veritas Long PCR Master Mix延伸速度10kb片段以下设置5 sec/kb,10kb片段以上设置10 sec/kb。M1:1 kb DNA Ladder;M2:50 kb DNA Ladder。结果显示,Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix可以扩增长达40 kb的人基因组片段。

 

可满足长片段cDNA扩增。以翌圣快速反转录试剂盒(Cat#11149ES)反转录293 RNA得到的产物为模板,扩增不同长度的cDNA片段。M1:1 kb DNA Ladder;M2:DL15000 DNA Marker。结果显示,Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix可满足1kb-14kb的cDNA扩增。

 

🧬 GC含量 20%-80% 广谱耐受

低至20%、高至80%的GC含量都能覆盖。高GC区域容易形成二级结构(发夹/G-四链体),Veritas的优化缓冲体系能有效打开这些结构,聚合酶平稳通过。

 

分别以50 ng人基因组、小鼠基因组和水稻基因组DNA为模板,不同产品按照各自最适程序进行扩增,扩增1kb以内不同GC含量的片段。M:1 kb DNA Ladder。结果显示,10166ES可覆盖20-80%GC含量的片段。

 

🎯 高灵敏度——1 pg 质粒也能检出

起始模板量低至1 pg(λDNA)/ 100 pg(gDNA)即可检出,微量样本也不怕。

 

可检测1 pg质粒。以1 pg-1 μg不同投入量的质粒为模板,不同产品按照各自最适程序进行扩增。M:DL10000 DNA Marker。结果显示,10166ES扩增质粒的灵敏度和特异性表现好。

 

可检测100 pg动物基因组。以1 pg-1 μg不同投入量的小鼠基因组DNA为模板,不同产品按照各自最适程序进行扩增。M:1kb DNA Ladder。结果显示,10166ES扩增动物DNA的灵敏度和特异性表现好。

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