Hifair® Advanced One Step RT-qPCR SYBR Green Kit是一款基于SYBR Green I染料进行荧光定量的试剂盒。使用基因特异性引物，反转录和qPCR反应在一管内完成，无需反复的开盖和移液操作，大大提高了检测效率，并降低了污染的风险。对于RNA样本，试剂盒采用耐热Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成cDNA，同时采用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase进行定量扩增。在优化的缓冲体系下，该试剂盒的检测灵敏度针对高表达的靶标, 可以检至0.1 pg，中等表达的靶标，可以检至1 pg。该试剂盒同时也适用于DNA样本的扩增定量。该试剂盒可实现不同动植物样本、细胞、微生物核酸的高灵敏检测和定量。
产品组分
| 组分编号 | 组分名称 | 11175ES20 | 11175ES70 |
|---|---|---|---|
| 11175-A | 2× Hifair® Advanced SG Buffer | 250 μL | 2×1.25 mL |
| 11175-B | Hifair® Advanced UH Enzyme Mix | 20 μL | 200 μL |
| 11175-C | RNase free H2O | 250 μL | 2×1.25 mL |
- 全仪器平台通用：适用于国内外常见荧光定量仪器
- 灵敏度高：针对RNA样本，灵敏度高达0.1 pg；针对DNA样本，灵敏度高至单拷贝
- 重复性好： 高、中、低模板下90复孔间差异小
- 精准度好：可精确分辨2倍浓度差异的RNA或DNA模板
- 稳定性好：预混体系可于4℃条件下放置24小时，性能不发生变化
- 全仪器平台通用
No Rox平台
Low Rox平台
High Rox平台
图.以293T细胞总RNA作为模板，分别在不同ROX类型机型上扩增不同GC含量的靶标。结果显示均可有效扩增，且熔解峰单一。
- 灵敏度高
RNA模板检测
图.以RNA模板进行测试时，对于高表达的靶标，可以检测至0.1pg级别，中等表达的靶标，可以检测至1pg级别；病毒类可以检测至E2。
DNA模板检测
图.以DNA样本进行测试时，可在轻松检测十位数拷贝以上的基因。另外针对以上样本的单拷贝检测，也可出现扩增信号。
- 灵敏度性能比对
图.分别以人293T细胞、HCV、新冠假病毒、拟南芥来源的RNA作为模板在不同的仪器上进行测试，结果显示，相较于进口品牌，翌圣的11175ES的灵敏度更好，荧光平台期更高。
- 精准度好
图.以293T细胞RNA为模板，2倍形式梯度稀释模板，以11175ES进行检测。结果显示，11175ES可以精确分辨2倍的浓度模板差异。
- 稳定性好
图.分别检测两种不同类型的模板，先加入引物、试剂、水等进行预混，在4℃条件下放置24小时后，再加入模板上机。结果显示，0时刻现配体系和体系预混24小时后的差别小，体系稳定性高。
图.将试剂置于超净台常温光照20小时后进行三对引物测试，结果显示，正常避光储存和常温光照20小时的试剂之间没有明显差异，体系稳定性好。
-25~-15℃避光储存，有效期1年。
Q：该试剂盒适用于哪些样本类型？
A：适用于动植物样本、细胞、微生物的RNA或DNA检测。对于RNA样本，试剂盒可高效合成cDNA并进行定量扩增；对于DNA样本，可直接进行qPCR扩增。
Q：试剂盒的储存条件和有效期是多久？
A：需在-25~15℃避光储存，有效期为1年。
Q：适用于哪些PCR仪器？
A：支持无需Rox校正的机型（如Bio-Rad CFX96、Eppendorf Mastercycler ep realplex、Roche LightCycler 480等），以及需要Low/High Rox校正的机型（如ABI 7500、StepOne Plus等）。具体型号请参考说明书。
Q：DNA样本是否需要反转录步骤？
A：不需要。DNA样本可直接进行qPCR扩增，跳过反转录步骤。
