Hifair® Lyo-Ready I Multiplex OneStep RT-qPCR Kit（UDG plus)是以RNA为模板进行多重定量PCR反应的试剂盒。在实验的过程中，逆转录和定量PCR在同一反应管中进行，简化了实验操作，降低了污染的风险。独特的Buffer和酶的设计，可用于一步法RT-qPCR冻干反应体系的配制和产品设计。
本试剂盒利用耐热Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第一链cDNA，并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的冻干Buffer，Enzymes Mix等，并添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重qPCR反应扩增效率的因子，能够在保证引物扩增效率的同时，进行多重荧光定量扩增反应。本试剂盒中匹配了冻干保护剂，可以用于冻干。
l 冻干后依然保持酶活性完整，性能和液体试剂一样
l 采用基因改造的抗体法热启动 Taq 酶，灵敏度高，5 copies/T可稳定检出
l 含引物探针的冻干球，在50℃热加速一个月，性能不受影响
l 快速程序下性能不受影响，30min即可出结果
l 引入了dUTP/UDG防污染系统，可有效防止气溶胶污染
l 含冻干保护剂，可直接进行冻干，也可作为液体试剂直接使用
1、冻干前后性能一致
使用以下条件测试16645液体试剂和其冻干球的性能，结果显示：16645冻干后复溶的试剂性能依旧稳定。
| 仪器 | 7500 | 液体体系（红色曲线） | 25 μL总体系，其中模板5uL |
| 模板 | 转录RNA模板 | 模板浓度 | 105、104、103 copies/uL |
| 冻干体系（蓝色曲线） | 20uL体系冻干（含引物探针），取1颗冻干球加20uL无酶水，5uL模板。 | ||
| 扩增程序 | 50°C 2 min；95°C 30 sec；40 cycles (95°C 5sec；60°C 10 sec) | ||
图1. 16645液体试剂和其冻干球性能测试
2、稳定性测试
将含HPIV引物探针的16645体系按说明书上冻干工艺和条件进行冻干，冻干球在50℃条件下加热一个月，与同批次刚出箱冻干球相比，扩增曲线峰形、Ct值、低浓度检出率（1copy/uL，20个重复，检出率均为100%）均没有差异，冻干球稳定性好。
| 仪器 | 7500 | 体系 | 25 μL |
| 模板 | 转录RNA模板 | 模板浓度 | 105、104、103 copies/uL及1 copy/uL |
| 对照组（红色曲线） | 20uL体系冻干（含引物探针），立即取1颗冻干球加20uL无酶水，5uL模板。 | ||
| 实验组（蓝色曲线） | 20uL体系冻干（含引物探针），冻干球于50℃放置30天，取1颗冻干球加20uL无酶水，5uL模板。 | ||
| 程序 | 50°C 2 min；95°C 30 sec；40 cycles (95°C 5sec；60°C 10 sec) | ||
图2. 16645冻干球性能及稳定性测试
-25~-15℃保存，有效期1年。
