荧光定量PCR案例|小鼠乳腺上皮细胞基因表达分析
样本&试剂&仪器平台
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样本来源 |
小鼠乳腺上皮细胞 |
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试剂信息 |
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仪器信息 |
耶拿Jena, Jena Qtower384G |
扩增片段CG含量&长度
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GC含量 |
46%~57%不等 |
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目标扩增长度 |
65bp~175bp不等 |
反应体系
以小鼠乳腺上皮细胞RNA为模板，取1μg RNA进行反转录，反转录体系20μl。cDNA稀释5倍后取1μl作模板进行定量。
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组分 |
体积 （μL） |
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Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) |
5 |
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Forward Primer (10 μM) |
0.2 |
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Reverse Primer (10 μM) |
0.2 |
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模板DNA/cDNA |
1 |
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无菌超纯水 |
Up to 10 |
扩增曲线&熔解曲线
多种基因扩增曲线呈现S型曲线，熔解曲线峰型单一，无非特异扩增。
文末福利
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