产品简介

Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (DNA digester plus)是Hifair® Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)的升级版即用型预混液，与前代Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase相比，本产品具有更强的残留物耐抑制性、更快的反转录速度以及更高的反转录产量。该预混液包含DNA digester Mix -V2和Hifair® AdvanceFast SuperMix。DNA digester Mix -V2针对残留DNA的消化能力大幅增强，可消化1000 ng内的DNA，最大程度上避免了RNA模板中残留的DNA污染风险，以保证后续结果更加可靠。Hifair® AdvanceFast SuperMix含有反转录反应所需的所有组分，实验时仅需加入RNA模板和RNase-free H₂O即可进行反转录反应。

本产品反转录产物适用于qPCR，不适用于后续基因克隆等长片段扩增，若有需求，推荐使用翌圣Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Cat#11149ES、Cat#11150ES)进行高效反转录。

 

产品信息

货号	11155ES10 / 11155ES60
规格	10 T / 100 T

 

组分信息

组分编号	组分名称	11155ES10	11155ES60
11155-A	Hifair® AdvanceFast SuperMix	60 μL	600 μL
11155-B	DNA Digester Mix-V2	20 μL	200 μL
11155-C	RNase-free Water	200 μL	1 mL* 2

 

储存条件

-25~-15℃保存，有效期12个月。

 

使用说明

1. 若实验需要去除残留DNA 

1. DNA消化

在RNase-free离心管中配制如下混合液，用移液器轻轻吹打混匀。37℃孵育2 min。

组分	投入量
RNase-free H2O	To 14 μL
DNA Digester Mix-V2	2 μL
Total RNA	10 pg -5 μg*
or mRNA	10 pg-500 ng

* 建议Total RNA的投入量不超过2 μg。如果目的基因的表达丰度低，可增加投入量至最多5 μg Total RNA。

2. 反转录反应体系配制

组分	投入量
上一步骤的反应液	14 μL
Hifair® AdvanceFast SuperMix	6 μL

3）反转录程序设置

温度	时间
55℃**	5 min
85℃	5 s

** 对于高GC含量模板或者复杂模板，可将反转录温度提高到60℃。

2. 若实验无需去除残留DNA 

1. 反转录反应体系配制

组分	投入量
Hifair® AdvanceFast SuperMix	6 μL
Total RNA	10 pg -5 μg
or mRNA	10 pg-500 ng
RNase-free H2O	To 20 μL

2. 反转录程序设置

温度	时间
55℃**	5 min
85℃	5 s

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

3. 所有操作均应在冰上进行，且操作过程应避免RNase污染。

 

Ver.CN20240527