荧光定量PCR案例|鱼鳃组织基因表达分析
样本&试剂&仪器平台
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样本来源 |
鱼鳃组织 |
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试剂信息 |
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仪器信息 |
Roche Lightcycler 480 |
扩增片段CG含量&长度
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GC含量 |
45%~55% |
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目标扩增长度 |
147bp~178bp |
反应体系
取1μg RNA进行反转录，反转录体系20μl。cDNA稀释10倍后取1μl作模板进行定量，定量体系10μl。
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组分 |
体积 （μL） |
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Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix ( 抗体法，No Rox) |
5 |
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Forward Primer (10 μM) |
0.2 |
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Reverse Primer (10 μM) |
0.2 |
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模板DNA/cDNA |
1 |
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无菌超纯水 |
Up to 10 |
反应程序
扩增曲线&熔解曲线
扩增曲线呈现S型曲线，熔解曲线峰型单一，无非特异扩增。
文末福利
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