UltraNuclease（全能核酸酶），又称非限制性核酸内切酶、广谱核酸酶；是一种来源于Serratia Marcescen的非特异性核酸内切酶，可在链内任意核苷酸间进行切割，将核酸完全消化成2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸，能够降解各种形式的（双链，单链，线状，环状，天然或变性）DNA和RNA，广泛用于去除生物制品中的核酸。

本品经基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表达纯化并在GMP环境下制备，不仅可在科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度，提高蛋白纯化效率及功能研究；还可以应用在病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业作为宿主残留核酸去除试剂，将宿主残留核酸降至皮克（pg）级别从而提高生物制品功效和安全性。

翌圣生物提供全能核酸酶及全能核酸酶残留检测试剂盒，产品已完成DMF备案，产品严格按照ISO13485质量体系生产，满足药物申报要求，已支持多家客户完成项目IND申报。

应用场景

• 去除疫苗、重组蛋白等生物制品中的外源性核酸。
• 去除AAV、LV等病毒颗粒表面残留核酸，提高病毒纯化效率。
• NGS样本测序前的样本处理中，能够有效去除人源核酸，提高样本纯度，从而优化测序效果
• 降低蛋白和细胞裂解液的粘度以及预防细胞结团

 

产品优势

• 符合法规要求：完成DMF备案，ISO13485质量体系进行GMP级产品生产
• 高活性：酶的比活≥1.5×10⁶ U/mg，能够快速高效地降解核酸
• 高质量：与公司M核酸酶有相同效果，可平替
• 经验丰富：产品已支持多家客户完成IND项目申报
• 配套检测：提供研发及GMP级别全能核酸酶，以及对应的核酸酶残留检测试剂盒 

严格的质量控制及生产标准

测项目	质量标准	检测方法
酶活	250-300 U/uL	通用底物法
比活	≥1.5×106 U/mg	通用底物法
蛋白纯度	≥99%	SDS-PAGE
蛋白酶	符合要求	通用底物法
细菌内毒素	符合要求	凝胶法
宿主蛋白	阴性	ELISA法
宿主DNA	阴性	qPCR法
无菌检测	无菌生长	通则1101
病原体检测	阴性（不得检出）	参照内部方法
支原体检测	阴性（不得检出）	参照内部方法
重金属检测	符合要求	通则0821

验证数据

• 温度&pH对酶活影响

• 盐离子浓度对酶活影响

• 表面活性剂对酶活影响

• 蛋白变性剂

• 其他常用试剂

• 和竞品M质量比较

为了匹配全能核酸酶的使用，翌圣生物也自主研发了能够特异性检测全能核酸酶检测试剂盒，能够有效检测出酶的残留，降低风险。翌圣全能核酸酶残留检测试剂盒验证方法参考2020中国药典<9101>分析方法验证指导原则进行研发生产，严格按照要点要求进行多指标检测（线性范围、专属性、准确度、精密度、灵敏度、加速稳定性等）。

全能核酸酶残留检测

翌圣自主研发的UCF.ME^® UltraNuclease ELISA Kit正是采用双抗体夹心酶联免疫检测（夹心ELISA）原理，能够准确检测样本中全能核酸酶的残留量，该试剂盒在线性、重复性、回收率及特异性等方面均表现稳定。

图1. 翌圣核酸酶ELISA试剂盒实验原理（双抗夹心ELISA法）

• 产品特点：

符合法规：按照法规要求进行全面验证，可提供验证报告；

保障品质：试剂盒原材料全自主研发，质量可控；

灵敏度高：定量限低至23.5pg/mL；

精密度高：批内重复性高，批间差异小；

专属性强：不与其他工程细胞蛋白产生交叉反应。

• 性能参数：

产品参数	参数内容
实验时长	3.5hours
实验原理	双抗夹心ELISA法
信号放大	生物素-链霉亲和素系统
检测波长	450nm和630nm
灵敏度	23.5pg/mL
检测范围	0.047~3 ng/mL
检测对象	全能核酸酶
适用机型	Molecular Devices：M和i系列
应用	检测细胞&基因治疗和重组腺相关病毒疫苗纯化工艺中的全能核酸酶残留量

◎  线性范围：0.047~3 ng/mL，R²＞0.99

   

◎  批次间重复性好

在样本中加入固定浓度的UltraNuclease，用3个不同批次的ELISA试剂盒进行检测，在核酸酶浓度3~0.186 ng/mL之间，检测回收率均在70%~110%之间，CV＜10%。
 

◎  模拟样本回收率

对于不同浓度UltraNuclease核酸酶样本回收率均在70%~130%之间，且优于其他品牌。

◎  特异性强

我们评估了全能核酸酶抗体与8种常见样本的非特异性结合，干扰组与对照组结果重合，未见干扰。

* 表示与阴性相比有显著性差异；NS：表示与阴性结果无显著差异

 

常见问题FAQ

◎  在哪一步中加入 UltraNuclease？

这取决于您处理的样本。在病毒纯化时，一般在病毒澄清后加入；大肠杆菌蛋白纯化时，可以在菌体裂解时就加入；在处理细胞结团问题时，可以直接加入培养基中与细胞共培养。

◎  如果反应温度无法达到37℃，该如何使用？

UltraNuclease的酶活性受到温度、处理时间、酶活单位的影响，如果温度无法达到37℃，可以适当添加酶的用量，或者延长孵育时间。

◎  UltraNuclease是否与蛋白酶抑制剂兼容？

可以兼容，但需要注意的是许多蛋白酶抑制剂含有EDTA。EDTA 开始高于1mM时，EDTA将抑制部分核酸酶的活性。

◎  如何去除 UltraNuclease？

可通过 TFF、透析及色谱柱等方法将其去除。

◎  UltraNuclease ELISA kit可否用于其他品牌全能核酸酶残留的检测？

我们不建议这样做。ELISA kit 完全是基于UltraNuclease开发，能够对UltraNuclease进行准确定量。其他品牌的全能核酸酶在序列、生产工艺等方面可能与UltraNuclease有所不同，检测结果可能不准确。

 

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产品定位	产品名称	货号	规格
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	UCF.ME® UltraNuclease GMP-grade  全能核酸酶同Benzonase Nuclease)	20157ES25/60 /80/90	25KU/100 KU /1MU/5MU
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