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Uracil DNA Glycosylase (UDG), Heat-Labile 热敏UDG
产品货号:10303ES60
产品规格:100 U
产品价格:¥683.00
类别:PCR相关

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  • 产品信息


    产品名称

    产品编号

    规格

    价格(元)

    Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile 热敏UDG

    10303ES60

    100 U

    683.00

    Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile 热敏UDG

    10303ES76

    500 U

    3083.00

    Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile 热敏UDG

    10303ES92

    10000 U

    面议


    产品描述


    热敏UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶)能催化水解含有尿嘧啶的DNA链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键,释放游离尿嘧啶。热敏UDG酶与普通UDG酶相比,避免了常规UDG酶灭活后可能存在的残留活性在常温下对含dU扩增产物的降解作用。本产品在室温下起作用,且对温度敏感、易于灭活。


    产品组分


    编号

    组分

    产品编号/规格

    10303ES60 (100 U)

    10303ES76 (500 U)

    10303ES92(10000U)

    10303-A

    Uracil DNA Glycosylase (UDG), Heat-Labile (1 U/μL)

    100 μL

    500 μL 

    10 mL


    产品应用


    1. 去除含dUPCR产物气溶胶污染。

    2. 去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基。


    酶活定义


    25℃30 min内完全降解1 μg含有尿嘧啶的dsDNA所需酶量定义为1个活性单位(U)。


    失活方式


    50℃,10 min


    运输储存方法


    干冰运输。-20℃保存,有效期一年。


    注意事项


    1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    2. 热敏UDG在多数PCR反应缓冲液中均有活性。


    质量控制


    核酸内外切酶残留检测:10 U的本酶和0.6 μg λ DNA-Hind III酶切产物37℃下孵育16 hDNA的电泳谱带不发生变化。

    RNase残留检测:10 U的本酶和1 μg HeLa细胞总RNA37℃下孵育1 hRNA的电泳谱带不发生变化。

    大肠杆菌DNA残留检测:10 U本品经E.coli16s rDNA特异性的TaqMan qPCR检测,E.coli基因组残留低于10拷贝。

    酶失活检测:10 U本品经50℃处理10 min,与1 μgdUdsDNA模板温育30 minDNA的电泳谱带不发生变化。


    应用实例


    1. 按下列体系配制PCR反应液:

    组分

    体积(μL

    终浓度

    10×PCR Buffer (Mg2+Plus)

    25 mM MgCl2

    1.5 mM

    dUTP (10 mM)

    0.6 mM

    dCTP / dGTP/ dATP/ dTTP (10 mM each)

    0.2 mM each

    模板DNA

    Optional 

    -

    引物1 (10 μM)

    2

    0.4 μM

    引物2 (10 μM)

    0.4 μM

    Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

    0.5 

    0.05 U/μL

    Heat-Labile UDG (1 U/μL)

    1 U/50 μL

    ddH2O

    Up to 50


    注:根据实验需要,dUTP终浓度可在0.2-0.6 mM 之间调整。可选择性掺入0.2 mM dTTP

    2. PCR反应:

    反应温度

    反应时间

    循环数

    目的

    25

    10 min

    1

    降解含U模板

    94

    2 min

    1

    UDG酶失活,模板预变性

    95

    10 sec

    30-35

    变性

    60

    20 sec

    退火

    72

    30 sec/kb

    延伸

    72

    5 min

    1

    终延伸

    注:25℃反应时间可以根据实验需要在5-10 min内调整。


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