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400-6111-883
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UCF.ME® Deoxyribonuclease I(DNase I) GMP-grade
产品货号:10611ES76
产品规格:500 U
产品价格:¥ 645
类别:RNA合成

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  • 产品信息

     

    产品名称

    产品编号

    规格

    价格(元)

     

    UCF.ME® Deoxyribonuclease I (DNase I) GMP-grade

    10611ES76

    500 U

    645

    10611ES84

    2000 U

    1965

    10611ES92

    10000 U

    6455

     

    产品描述

     

    脱氧核糖核酸酶I(DNase I)Deoxyribonuclease I,是一种核酸内切酶,可消化单链及双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸。它可使磷酸二酯键发生水解从而产生含有5'-磷酸基团和3'-OH基团的单脱氧核苷酸和寡脱氧核苷酸,平均消化产物最小为多聚四核苷酸DNase I可催化多种形式DNA,如单链DNA、双链DNA,甚至染色质(其切割速率受组蛋白影响)。最佳的工作pH范围是7-8,DNase I的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子如Co2+Mn2+Zn2+等激活。5 mM Ca2+可保护酶使其不被水解。在Mg2+存在下,该酶可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点;而在Mn2+存在的条件下,可同时识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割形成平末端,或1-2个核苷酸突出的粘末端。DNase I广泛应用于不含DNA的RNA制备;去除体外转录之后的模板DNA;在RT-PCR及RT-qPCR反应前制备不含DNA的RNA;结合DNA聚合酶I通过切口移位进行DNA标记;DNA片段化文库构建。

    本品是按照 GMP 工艺要求生产,产品以无菌液体形式提供。

     

    产品性质

     

    来源

    重组E. coli

    最适温度

    37℃

    白纯度

    95%

    储存缓冲液

    10 mM Tris-HCl pH 7.6,2 mM CaCl250%甘油

    活性单位定义

    37℃、10 min 内使 1 μg 的质粒 DNA 完全降解所需要的酶量。

    :具体产品质检数据及更多指标请查看批次质检报告

     

    产品组分

     

    组分编号

    组分名称

    产品编号/规格

    10611ES76 (500 U)

    10611ES84 (2000 U)

    10611ES92(10000 U)

    10611

    Deoxyribonuclease I (DNase I)

    250 μL

    1 mL

    5 mL

     

    运输和保存方法

     

    干冰运输。-20℃保存,有效期一年。推荐分装保存,避免反复冻融。

     

    注意事项

     

    1、酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20保存。

    2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

     

    应用实例

     

    反应体系使用RNase-free离心管及枪头配制如下反应体系:

    组分

    体积(μL)

    10×DNase I Buffer

    1 μL

    DNase I

    1 μL

    RNA

    X 

    RNase-free ddH2O

    Up to 10 μL

    10×DNase I Buffer配方为10 mM Tris-HCl, 2.5 mM MgCl2,0.5 mM CaCl2, pH7.6@25

    反应条件37℃,15-30 min后,加入终浓度2.5mM EDTA溶液混匀后65℃ 10 min。处理后的模板可用于后续RT-PCR等反应。

    DNase I失活或抑制加入EDTA至终浓度为2.5 mM后,65加热10 min可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂,达到毫摩尔/升浓度的锌离子,0.1%的SDS,DTT、巯基乙醇等还原剂,50-100 mM以上盐浓度均对DNase I有显著抑制作用。

     

    HB220325