DNase I,即Deoxyribonuclease I,中文名称为脱氧核糖核酸酶I,是一种可以消化单链或双链DNA的核酸内切酶。它水解磷酸二酯键,产生含有5'-磷酸基团和3'-OH基团的单脱氧核苷酸和寡脱氧核苷酸。DNase I最佳的工作pH范围是7-8,DNase I的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。在Mg2+存在下,DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点;而在Mn2+存在的条件下,DNase I可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端或有1-2个核苷酸突出的粘末端。可以用于各种RNA样品的处理。
- 高酶切效率:37℃孵育可快速高效降解DNA;
- 无RNase残留;
- 特异性强:特异性去除DNA,对RNA无影响;
- 底物多样性:可作用于单链DNA、双链DNA、染色质及DNA-RNA杂交链。
- 无RNase残留
将DNase I与底物RNA孵育,琼脂糖凝胶电泳比较RNA谱带变化。结果显示翌圣DNase I无RNase残留。
图1. RNase残留检测 C:对照
- 高效去除DNA,对RNA产物无影响
分别使用翌圣及进口品牌T*、N*的DNase I进行体外转录中DNA模板去除,结果显示翌圣DNase I的模板DNA去除效率与国际进口品牌相当。
图2. 体外转录中模板DNA去除 C:不加DNase I对照;T*:进口品牌T*;N*:进口品牌N*;M:Marker
- 应用于NGS建库,产量与进口进口品牌相当
分别使用翌圣及进口品牌T*的DNase I进行RNA建库中rRNA的去除,结果显示翌圣的DNase I用于RNA建库产量与进口品牌相当。
图3. DNase I用于RNA建库 T*:进口品牌T*
-25~-15℃保存,有效期2年。推荐分装保存,避免反复冻融。
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