Uracil-Specific Excision Reagent(缩写为USER)是尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)和DNA糖基化酶-裂解酶(Endo VIII)的混合酶,能在尿嘧啶位置产生单个核苷酸的缺口。UDG催化尿嘧啶碱基的切割,形成一个AP位点(脱碱基嘧啶位点),但保持磷酸二酯骨架结构完整。Endo VIII的裂解酶活力使脱碱基位点3′和5′端的磷酸二酯键断裂,释放无碱基的脱氧核糖。
应用场景:
- RNA链特异性文库构建;
- 尿嘧啶特异性删除介导的克隆(USER-LIC);
- TALE基本单位的组装;
- 单细胞多个cDNA串联建库。
- Endo VIII(Cat#14536ES)与UDG(Cat#14455ES)的混合酶;
- USER酶混合物能在DNA的dU位置产生一个单核苷酸缺口,适用于ssDNA、dsDNA及环状DNA;
- 无核酸酶、RNase残留,低宿主残留。
- dUTP切除效果与进口品牌N*一致
分别使用翌圣的Uracil-Specific Excision Reagent(1 U/μL)与进口品牌N*的同类产品(1 U/μL)切除10 pmol含dUTP的双链DNA,琼脂糖凝胶电泳检测结果表明,翌圣Uracil-Specific Excision Reagent与进口品牌N*的切除效果一致。
图1. dUTP切除效果对比图
- USER-LIC效果优于进口品牌N*
分别使用翌圣的Uracil-Specific Excision Reagent(1 U/μL)和进口品牌N*的同类产品(1 U/μL)连接600bp DNA片段构建载体,并导入到大肠杆菌中培养,观察培养皿上的菌落数,结果表明,翌圣Uracil-Specific Excision Reagent应用于USER-LIC效果优于进口品牌N*。
图2. 菌落数对比
- 客户反馈-RNA链特异性建库性能与进口品牌N*一致
客户测试翌圣14537ES与进口品牌N*的RNA链特异性建库性能,扩增曲线表明翌圣Uracil-Specific Excision Reagent与进口品牌N*的RNA链特异性建库性能一致。
图3. qPCR扩增曲线
- 客户反馈-超低的批间差异和高剪切效率
客户测试翌圣3个批次的Uracil-Specific Excision Reagent的剪切效率,柱状图表明翌圣Uracil-Specific Excision Reagent超低的批间差异和高剪切效率。
图4. 不同批次间的剪切效率
-15~-25℃保存,有效期1年。