病原UCF解决方案 | 血吸虫病检测,低负荷快筛还是虫种追踪?qPCR与tNGS双技术路径

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2026-08-11

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导语

血吸虫病是由血吸虫感染引起的寄生虫病。随着我国防治工作由大范围控制逐步迈向传播阻断与消除阶段,检测任务也从发现高感染度病例,转向识别低感染度人群、持续评估钉螺与动物宿主传播风险,并处理异位感染和复杂疑难病例。

血吸虫病检测应该选qPCR还是tNGS?当虫种或靶标明确,需要对人群、钉螺、动物宿主或环境样本开展快速批量筛查时,qPCR流程短、结果直接,是优先技术路径;当临床表现不典型、常规结果矛盾,需要多病原并行鉴别、虫种确认、关键位点分析或传播追踪时,可采用靶向tNGS获取序列信息。

更合理的分工是:qPCR承担已知靶标的快速检测和规模化监测,tNGS承担复杂样本解析、虫种鉴别及序列层面的研究与追踪。两种技术均需结合流行病学史、虫卵或其他病原学检查、血清学、影像学及临床表现综合解释。

【原料解决方案】针对血吸虫病分子检测,翌圣生物提供从病原核酸提取、qPCR扩增,到tNGS多重扩增建库及RDC定制开发的原料支持,服务于疾控、海关、检测机构、科研单位及IVD企业的筛查、鉴别和监测方案。

翌圣生物完整解决方案
01
病原核酸提取粪便、血液、组织、脑脊液、钉螺及环境样本
02
荧光定量PCR明确靶标的快速筛查与批量监测
03
病原tNGS复杂鉴别、虫种确认与序列追踪
Part 1 病原核酸提取解决方案
多类型样本适配:可围绕血液、组织等病原检测样本开展流程验证;粪便、钉螺和环境样本需根据基质特点优化裂解与纯化条件;
低丰度核酸回收:对血浆、脑脊液等有限样本关注游离核酸回收率,减少转移、冻融和降解带来的损失;
自动化与标准化:磁珠法便于批量处理和流程放大,适合疾控监测及产品化验证。

血吸虫病样本类型跨度大。粪便、组织和环境样本可能含有扩增抑制物,钉螺混样还涉及样本不均一与低感染率问题;血浆或脑脊液中的游离核酸含量则可能很低。方案验证应分别评估裂解效率、核酸回收、抑制去除、混样能力和交叉污染,并设置过程内参监控提取与扩增全过程。

Part 2 荧光定量PCR检测解决方案

qPCR可围绕日本血吸虫等明确虫种的特异区域或经验证的高拷贝重复序列设计单重或多重体系,适用于低感染度人群辅助检测、钉螺和动物宿主筛查、环境核酸监测以及明确靶标的产品开发。靶标设计应兼顾虫种特异性、区域株系差异与近缘寄生虫交叉反应,必要时采用双靶标或独立方法复核。

01
Hieff Unicon® Universal Superfast qPCR Mix(One Tube)(Cat# 16924ES)

通用型全预混、高灵敏并支持快速扩增的多重qPCR预混液,适合强调检测时效和批量通量的血吸虫核酸检测方案。

02
Hieff Unicon® Pure Pro U+ qPCR Mix(One Tube)(Cat# 16713ES)

通用型高灵敏、防污染多重qPCR预混液,适合低拷贝靶标、复杂样本基质和多靶标联合体系开发。

03
Hieff Unicon® Lyo-Ready I TaqMan Multiplex qPCR Mix(UDG plus)(Cat# 11893ES)

可冻干的快速qPCR预混体系,适合需要常温运输、长期储存或现场应用形态的产品开发。

快速与通量:一管式预混体系减少配液步骤,适合大量人群、钉螺和宿主样本筛查;
低拷贝检测:消除阶段应重点验证检出限、临界浓度阳性率、重复性和混样检出能力;
稳定与防污染:dUTP/UDG体系有助于降低扩增产物污染风险,并可围绕加速和冻融稳定性开展评价;
平台适配:应在目标仪器、反应体积和快速程序下完成灵敏度、特异性及批间一致性确认。
qPCR阳性提示样本中存在目标核酸,但不应脱离流行病学史和其他实验室证据单独判断现症感染;阴性结果也不能在取样不当、虫体负荷极低或存在抑制时单独排除感染。
Part 3 血吸虫病tNGS鉴别与传播追踪

基于多重扩增子的tNGS可将血吸虫相关靶标与需要鉴别的其他寄生虫或病原靶标纳入同一Panel。对于脑血吸虫病、肝脏肉芽肿等临床表现不典型的疑难病例,可在脑脊液或穿刺组织等珍贵样本中辅助寻找低丰度核酸线索;在公共卫生场景中,还可用于虫种确认、关键位点分析和传播关系研究。

tNGS的结果质量取决于Panel覆盖范围、引物扩增均一性、测序深度、生信数据库和对照体系。低丰度reads不能脱离覆盖特征、阴性对照、重复检测及临床证据直接解释,必要时应使用独立qPCR、Sanger测序或其他方法复核。

01
复杂寄生虫症候群Panel

通过多靶标并行扩增,覆盖血吸虫及临床需要鉴别的其他寄生虫,提高脑脊液、组织等有限样本的信息利用率。

02
长片段多重PCR扩增

4× Hieff® Multiplex PCR Master Mix 2.0(Cat# 12977ES)支持2000 bp以内不同片段长度的多重扩增,适合关键基因、连续变异区域和更大范围靶标覆盖。

03
超多重Panel扩增

4× Hieff® Multiplex PCR Master Mix(Cat# 12948ES)支持高重数Panel,可并行覆盖血吸虫虫种鉴别靶标及其他病原,并关注低背景与扩增均一性。

Part 4 病原tNGS产品定制化服务(tNGS RDC)

tNGS RDC(Research Development Center)可根据企业客户的血吸虫病或复杂寄生虫症候群产品规划,提供靶标筛选、Panel设计、引物池开发、扩增均一性优化、原料筛选、返样验证和产品定型支持。

客户项目创意
项目论证
研发设计
产品小样
小试、中试
产品定型
稳定供货
定制项目类型
复杂寄生虫症候群Panel:覆盖血吸虫与重点鉴别寄生虫的检测和虫种确认靶标;
关键基因分型Panel:围绕虫种特异区和具有分子流行病学价值的区域开发靶向方案;
单一病原长片段方案:以长片段多重PCR扩增为主,兼容二代或三代测序平台;
多基质体系优化:针对粪便、血液、组织、脑脊液、钉螺和环境样本的低载量、抑制及宿主背景开展返样优化。
定制项目支持实力
IVD研发中心(IVD RDC)
  • 定制化IVD原料开发
  • 分子诊断体系开发经验
  • 高频交互与快速响应
超洁净分子酶工厂
  • 转产放大与规模化生产
  • ISO 13485质量体系管理
  • 产能、品质及成本控制
分子酶筛选与研发平台
  • 高通量酶筛选与测试
  • 发酵、纯化和分子酶研发
  • 定制项目候选原酶支持
翌圣生物技术研究院
  • 产学研联动
  • 新酶发现与酶进化
  • 定向改造与原料资源积累
血吸虫病检测方案如何选择?

低感染度人群或明确靶标快速检测:优先采用病原核酸提取+qPCR,重点验证样本类型、低拷贝检出、抑制监控和复核规则。

钉螺、动物宿主和环境批量监测:采用自动化核酸提取+qPCR,重点关注混样策略、通量、交叉污染和批间稳定性。

异位感染或复杂疑难病例:在常规病原学、血清学和影像学基础上,采用复杂寄生虫Panel+tNGS辅助鉴别,并对低丰度结果复核。

虫种确认、关键位点和传播研究:根据所需分辨率选择虫种鉴别Panel、长片段方案或更广覆盖的靶向测序方案。

常见问题
血吸虫病常规分子检测使用qPCR还是tNGS?

明确靶标的快速检测和批量监测优先使用qPCR;复杂样本、多病原鉴别、虫种确认和序列追踪可使用tNGS。

qPCR阴性是否可以完全排除感染?

不能。结果受样本类型、采样时间、虫体负荷、核酸质量和抑制物影响,应结合虫卵检查、血清学、影像学和流行病学资料综合判断。

tNGS检出少量血吸虫序列就能确诊吗?

不能只依据少量reads下结论。需结合靶标覆盖、序列特异性、阴性对照、重复检测、样本背景及临床证据,必要时用独立方法复核。

结语

血吸虫病防控进入低流行与消除阶段后,检测方案既要发现低丰度信号,也要在必要时获得更深的序列信息。qPCR适合已知靶标的快速筛查和规模化监测;病原tNGS适合复杂疑难样本鉴别、虫种确认、关键位点分析和传播研究。以qPCR承担前线筛查,以tNGS补充鉴别与序列证据,再与虫卵检查、血清学、影像学和流行病学调查综合解释,可形成更清晰的分层技术路径。翌圣生物提供从病原核酸提取、qPCR扩增,到tNGS多重扩增建库和RDC定制开发的原料支持。

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qPCR Mix 四代快速、低残留、全预混 Hieff Unicon® Universal Superfast qPCR Mix(One Tube) 16924ES
三代全预混、低残留 Hieff Unicon® Pure Pro U+ qPCR Mix(One Tube) 16713ES
三代通用全预混 Hieff Unicon® Universal TaqMan Pro U+ qPCR Mix(One Tube) 16710ES
二代全预混(5×浓度) Hieff Unicon® Universal TaqMan Multiplex qPCR Master Mix(UDG plus) 13891ES
一代全预混 Hieff Unicon® TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus) 13171ES
耐抑制性强 Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix 11211ES/11212ES
高灵敏、可冻干 Hifair Unicon® Lyo-Ready I TaqMan Multiplex qPCR Mix (UDG plus) 11893ES
tNGS及配套产品推荐
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一步法逆转录试剂盒 一步法逆转录多重扩增 Hieff® Multiplex RT-PCR Kit多重RT-PCR 试剂盒 12950ES
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多重扩增试剂 长片段多重扩增 4×Hieff® Multiplex PCR Master Mix 2.0 4×多重PCR 预混液 12977ES
超多重扩增 4×Hieff® Multiplex PCR Master Mix 4×多重PCR 预混液 12948ES
逆转录试剂 预混版逆转录 Hieff NGS® 1st cDNA Synthesis Mix一链cDNA合成预混液 12958ES
基础版逆转录 Hieff NGS® 1st cDNA Synthesis Mix 一链cDNA合成预混液 12946ES
核酸清除剂 气溶胶核酸清除 Non-Corrosive Nucleic Acid Remover无腐蚀核酸清除试剂 19710ES
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