HPV DNA分型检测｜翌圣全套分子原料，助力宫颈癌早筛

宫颈癌是迄今唯一病因明确、可防可治的癌症。全球研究显示，99.7%的宫颈癌患者体内可检出高危型人乳头瘤病毒（HPV），其中HPV 16、18、45、31型合计感染约占80%。HPV感染极为普遍，约70%–80%有性生活史的女性一生中至少感染一次；而从感染到癌变平均有10–15年的窗口期，且高危型持续感染在发展为癌症前几乎没有任何症状。这意味着定期筛查是唯一能在可治愈阶段发现宫颈病变的手段，也决定了HPV检测作为宫颈癌筛查是一个长期、高频、刚需的市场。HPVDNA 检测凭借高灵敏度、可实现基因分型的优势，是目前国内宫颈癌初筛的主流技术手段，也是 NMPA 注册申报、两癌筛查项目首选检测方案。

  

随着HPV核酸检测纳入集采，筛查证从稀缺资质变为标准配置、产品分型能力不断升级的竞争格局下，优质、稳定的国产原料替代势在必行。翌圣生物作为分子诊断酶原料的代表性企业，其Zyme EditorTM创新型酶改造平台，已完成130余种高端分子酶的改造，且严格按照ISO13485进行质量管控，同时具备从5L到1500L的规模化产能放大能力，可为IVD企业、第三方检验机构、科研机构等提供高品质、高性价比的分子诊断酶原料。

  

解决方案：覆盖“提取—扩增”全流程的HPV检测原料方案

HPV 检测的完整链路包括样本采集、核酸提取与荧光定量PCR扩增。样本类型涵盖医生采集的宫颈脱落细胞、阴道自采样拭子以及尿液等，核酸提取质量直接决定下游检测的灵敏度与稳定性。翌圣生物可提供从样本前处理到多重qPCR的完整原料方案：以磁珠法提取试剂盒完成高质量核酸纯化，再配合针对HPV分型优化的多重qPCR预混液完成检测。

1. 样本前处理：18306 磁珠法病原 DNA/RNA 提取试剂盒

该试剂盒采用化学法与机械法相结合的裂解方式，可在40分钟内获得高质量的病原DNA/RNA，涵盖病毒、支原体、细菌、真菌等微生物，单样本操作简便快捷，兼容拭子、全血、血浆、痰液、肺泡灌洗液、脑脊液等多种样本。

 

提取效果展示

 

图1. 18306和竞品M提取效果比较

将低拷贝数的白色念球菌、粪肠球菌、草分枝杆菌、肺炎克雷伯菌和金黄色葡萄球菌，分别掺入拭子样本中，18306和竞品M提取流程进行提取，使用qPCR法对提取得到的微生物核酸进行定量，结果表明：18306ES对拭子样本中不同微生物的提取效率优于竞品M。

 

2. 荧光PCR 检测试剂

2.1 常规液体试剂：Hieff Unicon® Robust Multiplex qPCR PreMix V1 (UDG Plus)（Cat#16945）

该试剂核心酶原料采用新一代双封闭抗体法热启动Taq酶，同时封闭其5′→3′聚合酶及5′→3′外切酶活性，实现酶的高效封闭与准确释放；且具有较强的耐受性，兼容核酸释放剂，支持口腔拭子直扩。

分型效果展示

 

图2. 16945和友商试剂HPV分型效果比较

使用友商试剂和16945，同时检测12种HPV型别混合质粒（10-7、10-9两个浓度梯度）和单质粒（10-7浓度），结果显示：两者对混合型质粒均没有漏检、低浓度检出率和峰形相当，16945适用于HPV分型检测。

 

2.2 无甘油可冻干试剂：Hifair® Lyo-Ready Robust Multiplex qPCR Kit（UDG plus)（Cat#16940）

该试剂甘油含量极低，匹配了冻干保护剂，可支持原位冻干与冻干微芯等不同形式的冻干，便于成品试剂盒的常温储存和运输；且冻干球支持25 uL全体系复溶，有效提高检测敏感性。

表 1. 使用16940冻干微芯检测98例HPV临床样本

样本	类别	数量
HPV临床样本	16940检出数量	98
	友商试剂检出数量	98
	Ct值（16940＜友商数量）	43
	Ct值（16940＝友商数量）	24
	Ct值（16940＞友商数量）	31

 

分子诊断原料分享

翌圣生物深耕酶原料领域多年，为IVD企业、第三方检验机构及科研院所提供高品质、高性价比的分子诊断PCR原料——从逆转录酶、RNase抑制剂、Taq DNA聚合酶、UDG/UNG酶、Taq酶抗体、dNTPs等单组份，到经过体系优化的qPCR/RT-qPCR预混液，以及各种定制化服务，覆盖诊断试剂开发全流程，适用于临床诊断、食品安全检测、动物疫病防控、公共卫生应急等各个领域。

我们致力于以性能优越、供应稳定的分子诊断酶原料，助力下游客户打造更精准、更高效的诊断方案，共同推动分子诊断行业向前发展。

产品功能	产品功能	产品名称	货号
仪器	全自动核酸提取仪	96 通道全自动核酸提取仪	80510ES
样本前处理	磁珠法核酸提取	磁珠法病原DNA/RNA提取试剂盒	18306ES
qPCR Mix	HPV-DNA检测（不可冻干）	Hieff Unicon® Robust Multiplex qPCR PreMix V1 (UDG Plus)	16945ES
qPCR Mix	HPV-DNA检测（可冻干）	Hifair® Lyo-Ready Robust Multiplex qPCR Kit（UDG plus)	16940ES
RT-qPCR Kit	HPV-RNA检测（不可冻干）	Hifair® C203P1 Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)	16630ES
qPCR Mix	HPV-甲基化（不可冻干）	BioSensitive MethyProbe qPCR Master Mix	16701ES
配套原料-逆转录酶	逆转录酶（E6/E7 mRNA 用）	Hifair UCF. ME® Advanced Reverse Transcriptase (200 U/μL)	14614ES
配套原料-Taq酶	扩增体系用	Hieff Unicon® Robust Hotstart Taq DNA Polymerase (20 U/μL)	14325ES
配套原料-RNase抑制剂	RNase 抑制剂	Murine RNase inhibitor (40 U/μL)	10603ES
仪器	实时荧光定量 PCR 分析系统	Celemetor® 实时荧光定量 PCR 分析系统	80521ES
仪器	全自动核酸提取仪	96 通道全自动核酸提取仪	80510ES
耗材	环境核酸清除	核酸清除剂	19702ES