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400-6111-883
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400-6111-883
Hifair® V nCov Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit
产品货号:13110ES60
产品规格:100 T
产品价格:¥780.00
类别:RT-qPCR

说明书下载

  • 产品信息

    产品名称

    产品编号

    规格

    价格(元)

    促销价(元)

    Hifair® V nCov Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit

    13110ES60

    100 T

    2782.00

    780.00

    Hifair® V nCov Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit

    13110ES80

    1000 T

    21832.00

    6800.00

    Hifair® V nCov Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit

    13110ES92

    10000 T

    168882.00

    60000.00


    产品描述

    Hifair® V nCov Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit是以RNA为模板进行多重定量PCR反应的试剂盒。在实验的过程中,逆转录和定量PCR在同一反应管中进行,简化了实验操作,降低了污染的风险。

    本试剂盒利用耐热Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第一链cDNA,并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的MP Buffer,Enzymes Mix等,缓冲液中已含有Mg2+dNTP等,并添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重qPCR反应扩增效率的因子,能够保证引物扩增效率的同时,进行多达四重的反应。


    产品组分

    组分编号

    组分名称

    产品编号/规格

    13110ES60 (100 T)

    13110ES80 (1000 T)

    13110ES92 (10000 T)

    13110-A

    2×Hifair® V MP Buffera,b

    1.2 mL

    12 mL 

    120 mL

    13110-B

    Hifair® V Enzyme Mixc

    100 μL

    1 mL

    5 mL×2

    13110-C

    RNase Free H2O

    1.2 mL

    12 mL

    120 mL

    【注】a) 2×Hifair® V MP Buffer为Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer的简写。

    b) 不含Rox reference dye。如需,推荐使用货号10200ES产品。

    c) Hifair® V Enzyme Mix主要包含有耐热Hifair® V Reverse Transcriptase、RNase inhibitor和UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase。


    适用机型

    ABI系列:ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne, StepOne Plus; 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 and 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;

    Bio-Rad系列:Bio-Rad CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;

    Roche系列:Roche Applied Science LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;

    其他系列:Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;

    Eppendorf Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;

    Qiagen Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;

    Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler; Illumina Eco qPCR.


    运输与保存方式

    冰袋运输。-20保存,有效期1年。本品避免反复冻融。建议分装保存。


    注意事项

    1. 实验过程中请使用RNase free耗材。
    2.
    为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
    3. 本产品仅作科研用途!


    反应体系

    组分

    体积(μL)

    体积(μL)

    终浓度

    2×Hifair® V MP Buffer

    12

    15

    Hifair® V Enzyme Mix

    1

    1.5

    -

    Primer/Probe Mix (10 μM)

    1-4

    1-4

    0.4 μM

    模板 RNA

    1-5

    1-10

    -

    RNase Free H2O

    To 25

    To 30

    -

    】:使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。

    a) 引物浓度:Primer Mix中包含多对引物,通常每条引物终浓度为0.4 μM,也可以根据情况在0.1-1.0 μM间进行调整。

    b) 探针浓度Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针,每条探针的浓度可根据具体情况在50-300 nM间调整。

    c) 模板稀释:qPCR灵敏度极高,建议将模板进行稀释使用,控制Ct值在20-35之间适宜。

    d) 反应体系:推荐使用25 μL、30 μL或50 μL,以保证目的基因扩增的有效性和重复性。

    e) 体系配制:请于超净工作台内配制,并使用无核酸酶残留的枪头、反应管;推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。


    标准扩增程序


    反应阶段

    温度

    时间

    循环数

    1

    逆转录

    50℃a

    10 min

    1

    2

    预变性

    95℃

    5 min

    1

    3

    扩增反应

    95℃

    15 sec

    45

    60℃b

    30 secc

    【注】                                                                                             

    a) 逆转录:42℃或者50℃均可,时间10-15 min。

    b) 扩增反应:扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整CDC官方推荐的ORF1ab和N引物,退火温度建议≥60℃。

    c) 荧光信号采集:不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同,请根据最短时间限制进行设置。

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    HB200219