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病原UCF解决方案 | 布鲁氏菌病检测,快筛还是深挖?qPCR与tNGS双技术路径

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2026-08-04

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导语

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的人兽共患传染病,常与感染动物接触、职业暴露及未经充分处理的动物产品有关。其临床表现可缺乏特异性,慢性或局灶性感染又可能累及骨关节等部位,因此实验室检测既要解决快速发现,也要兼顾复杂样本和流行病学调查。

布鲁氏菌检测应该选qPCR还是tNGS?当目标是已知病原的快速筛查、疑似病例辅助检测、重点职业人群或动物源样本批量监测时,荧光定量PCR流程短、靶向明确;当样本菌量低、培养阴性但仍高度怀疑感染,或需要扩大菌种、分型、毒力/耐药相关区域覆盖并获得序列证据时,可采用靶向tNGS。

更合理的分层路径是:qPCR承担快速定向检测,tNGS承担疑难样本补充分析、分型和溯源,并与培养、血清学、临床和流行病学资料综合解释。

【原料解决方案】翌圣生物提供从血液、血浆、组织和动物源样本核酸提取,到qPCR扩增、tNGS多重扩增建库及RDC定制开发的原料支持,服务疾控、动物疫控、海关、检测机构及IVD企业。

翌圣生物完整解决方案
01
核酸提取低菌量血液、组织及动物源样本
02
荧光定量qPCR布鲁氏菌快速筛查与定向确认
03
病原tNGS复杂感染、分型与流行病学溯源
Part 1 核酸提取解决方案
样本兼容性好:兼容拭子、全血、血浆、痰液、肺泡灌洗液和脑脊液等样本,可围绕血液、骨髓、组织及动物源样本开展适配;
操作简便快速:原文单样本提取流程约40 min,可搭配自动化设备建设批量检测流程;
病原适用范围广:化学法与机械法结合,有助于提升细菌等微生物核酸释放和纯化。

布鲁氏菌可在宿主细胞内存活,外周血游离菌量可能较低。方案开发应重点验证样本量、裂解效率、核酸回收、宿主背景、抑制物去除和内标监控;深部感染样本还需考虑组织均质及不同基质对扩增的影响。

Part 2 荧光定量qPCR检测解决方案

qPCR可围绕布鲁氏菌属特异靶标及需要鉴别的种型相关靶标设计单重或多重体系,用于疑似病例快速检测、职业暴露监测、动物疫情筛查及产品研发。阳性结果应结合血清学、培养和流行病学信息解释;阴性结果不能脱离采样时机、样本类型和菌量单独排除感染。

01
Hieff Unicon® Universal Superfast qPCR Mix(One Tube)(16924ES)

通用型全预混、高灵敏并支持快速扩增,适合强调时效和批量通量的多重qPCR方案。

02
Hieff Unicon® Pure Pro U+ qPCR Mix(One Tube)(16713ES)

兼顾高灵敏与防污染设计,适合低浓度模板检测和常规实验室体系开发。

03
Hieff Unicon® Lyo-Ready I TaqMan Multiplex qPCR Mix(UDG plus)(11893ES)

可冻干快速qPCR预混液,适合现场应用、常温运输或长期储存形态开发。

快速与批量:一管式预混体系减少配液步骤,支持快速程序;
低浓度检测:优化缓冲体系有助于提高低浓度模板检测能力,最终LoD需结合样本前处理和靶标验证;
稳定与防污染:部分体系采用dUTP/UDG设计,并可开展加速与冻融稳定性评价;
多平台适配:可围绕Bio-Rad CFX96、ABI Q5、7500、SLAN及天隆等平台验证。
Part 3 布鲁氏菌tNGS多重扩增与分子溯源

靶向tNGS可在一个Panel中覆盖布鲁氏菌属鉴定、种型区分、分型位点及关注的毒力或耐药相关区域,适合低菌量复杂样本补充分析、培养困难样本研究、动物—人传播调查及菌株序列比较。对于布病性脊柱炎等深部感染,tNGS可提供额外分子证据,但仍需结合临床、影像和其他实验室结果。

tNGS输出受Panel设计、扩增均一性、测序深度、宿主背景和生信数据库影响。若目标是高分辨率菌株亲缘关系或完整传播链分析,应根据分辨率要求评估长片段Panel、培养分离物测序或全基因组方案。

01
长片段多重PCR扩增

4× Hieff® Multiplex PCR Master Mix 2.0(12977ES)支持2000 bp以内不同片段长度的多重扩增,适合连续分型区域和较长基因区段覆盖。

02
低背景超多重PCR扩增

4× Hieff® Multiplex PCR Master Mix(12948ES)支持1—2000重Panel扩增,适合并行覆盖鉴定、分型和质控靶标。

Part 4 病原tNGS产品定制化服务(tNGS RDC)

tNGS RDC可提供布鲁氏菌Panel靶标筛选、引物池设计、扩增均一性优化、原料筛选、返样验证和产品定型支持。

项目创意
项目论证
研发设计
产品小样
小试、中试
产品定型
稳定供货
定制项目类型
布鲁氏菌属与种型鉴别Panel:覆盖属特异和重点种型鉴别靶标;
分型与溯源Panel:围绕分型位点和连续变异区域开发多重扩增方案;
人兽共患联合监测Panel:按应用场景覆盖布鲁氏菌及其他相关动物源病原;
复杂样本体系优化:针对低菌量血液、组织和动物源样本开展提取与扩增返样优化。
定制项目支持实力
IVD研发中心
  • 定制化IVD原料开发
  • 分子诊断体系开发经验
  • 高频交互与快速响应
超洁净分子酶工厂
  • 规模化生产
  • ISO 13485质量体系
  • 稳定供货
分子酶研发平台
  • 高通量酶筛选
  • 发酵与纯化
  • 候选原酶支持
技术研究院
  • 产学研联动
  • 新酶发现
  • 定向改造
布鲁氏菌病检测方案如何选择?

疑似病例或动物源样本快速筛查:核酸提取+多重qPCR,重点验证低菌量检出、内标和抗抑制能力。

种型或少数已知靶标鉴别:采用多重qPCR并明确覆盖范围。

复杂感染、培养阴性或多位点分析:采用多重扩增Panel+tNGS,关注测序深度和变异判读。

暴发传播链或跨区域溯源:按分辨率选择长片段Panel或更广覆盖的基因组方案。

常见问题
布鲁氏菌病快速检测选qPCR还是tNGS?

病原明确且重视时效时优先qPCR;复杂样本、多位点分型和溯源可采用tNGS。

tNGS能否替代培养和血清学?

不能完全替代。序列证据、活菌培养、抗体结果和临床表现解决的问题不同,应综合解释。

为什么低菌量样本容易漏检?

胞内寄生、采样时机、核酸损失、抑制物和宿主背景都会降低有效信号,需要全流程质控。

结语

布鲁氏菌病检测需要兼顾快速发现与后续分型溯源。qPCR适合明确靶标的快速筛查、定向确认和批量监测;tNGS适合低菌量复杂样本补充分析、种型/分型位点覆盖和公共卫生溯源。以qPCR承担前线检测、以tNGS承担深度分析,再与培养、血清学及流行病学资料综合验证,可形成更清晰的分层路径。

荧光定量PCR系列产品推荐
产品类型 产品功能 产品名称 货号
核酸提取 提取试剂盒 MolPure® Magnetic Pathogen DNA/RNA Kit 磁珠法病原DNA/RNA提取试剂盒 18306ES
核酸提取仪 96通道自动化核酸提取仪 80510ES
qPCR Mix 四代快速、低残留、全预混 Hieff Unicon® Universal Superfast qPCR Mix(One Tube) 16924ES
三代全预混、低残留 Hieff Unicon® Pure Pro U+ qPCR Mix(One Tube) 16713ES
三代通用全预混 Hieff Unicon® Universal TaqMan Pro U+ qPCR Mix(One Tube) 16710ES
二代全预混(5×浓度) Hieff Unicon® Universal TaqMan Multiplex qPCR Master Mix(UDG plus) 13891ES
一代全预混 Hieff Unicon® TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus) 13171ES
耐抑制性强 Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix 11211ES/11212ES
高灵敏、可冻干 Hifair Unicon® Lyo-Ready I TaqMan Multiplex qPCR Mix (UDG plus) 11893ES
tNGS及配套产品推荐
产品类型 产品功能 产品名称 货号
核酸提取 提取试剂盒 MolPure® Magnetic Pathogen DNA/RNA Kit 磁珠法病原DNA/RNA提取试剂盒 18306ES
核酸提取仪 96通道自动化核酸提取仪 80510ES
一步法逆转录试剂盒 一步法逆转录多重扩增 Hieff® Multiplex RT-PCR Kit多重RT-PCR 试剂盒 12950ES
长片段一步法逆转录多重扩增 Hieff® AccuLong Onestep Multiplex RT-PCR kit 13315ES
多重扩增试剂 长片段多重扩增 4×Hieff® Multiplex PCR Master Mix 2.0 4×多重PCR 预混液 12977ES
超多重扩增 4×Hieff® Multiplex PCR Master Mix 4×多重PCR 预混液 12948ES
逆转录试剂 预混版逆转录 Hieff NGS® 1st cDNA Synthesis Mix一链cDNA合成预混液 12958ES
基础版逆转录 Hieff NGS® 1st cDNA Synthesis Mix 一链cDNA合成预混液 12946ES
核酸清除剂 气溶胶核酸清除 Non-Corrosive Nucleic Acid Remover无腐蚀核酸清除试剂 19710ES
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