等温核酸扩增技术（INAAT）主要用于分子生物学领域，用于鉴定和分析核酸。它主要用于DNA，RNA，细胞蛋白，离子，分子等。INAAT提供快速，灵敏和准确的遗传和感染性疾病诊断。它提供扩增子，用于生产主要用于生物传感，生物成像和生物医学的各种核酸。此外，INAAT还用于检测多种疾病，如流感，艾滋病毒，结核病，衣原体和淋病（CT / NG），甲型肝炎和乙型肝炎等。等温扩增按照技术可以分为：LAMP、RPA、CPA、SDA、RCA、HDA等。

LAMP目前是等温扩增细分领域中应用较为广泛的技术，其采用4-6条能够识别目的基因上的6个特异区域的引物，依赖于Bst DNA聚合酶的强链置换活性，在30分钟内扩增目的产物可达10⁹-10¹⁰倍。LAMP检测方法分为多种，包括染料法、pH显色法、浊度法、HNB，钙黄绿素等。我司最新开发的荧光法检测试剂盒具有灵敏度高、引物适用性好、在特异性、耐受性和稳定性上均有较为优秀的表现。在与同类产品的对上，具有较为明显的优势。

表1.不同等温扩增技术对比

分类	引物数量	反应温度	酶数量	优点	缺点	临床检验
RPA	4	30-42	3	反应时间短，较高的特异性	电泳检测时需要对产物进行纯化（扩增体系存在大量的酶类）	病原体核酸检测；mRNA检测、突变基因检测
LAMP	4	60-65	1	涉及的酶较少，灵敏度高	引物复杂	病原检测；基因突变检测和癌基因的分型
CPA	5、6	63	1	涉及的酶较少，灵敏度和特异性高	引物及反应体系较为复杂、假阳性高	病原检测、癌基因检测、mRNA检测
SDA	4	37	2	效率高、快速简便	需要非标准的核苷酸和昂贵的酶类，产物两端还残留核酸内切酶的识别序列	病原检测；基因突变检测、蛋白检查
RCA	1或多	37	1	种类多、应用广泛、产物是单恋DNA	需要环状DNA模板	蛋白检测；病原检测；细胞免疫
HDA	2	37	2	引物设计简单；灵敏度高	只能扩增短序列；容易产生二聚体	病原体检测；miRNA的定量检测

 

 

RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus) 

产品特点

图1.LAMP试剂盒反应过程

 

操作简便：反应时间短，实验室环境要求低，可搭配微流控芯片或便携式检测仪快速检测；

灵敏度：50copies/T，25 μL体系；

引物适用性好：N-2 引物、E 基因引物、 内参引物扩增等均有较好的适用性；

特异性：48孔NTC完全不出峰，特异性较强；

耐受性：对部分核酸释放剂耐受性较好；

稳定性高：37℃稳定5天稳定性较好，可耐受反复冻融10次以上；

市场优势：性能优于同类国内外竞品，性价比高。

RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)

产品性能展示

灵敏度高

图2.灵敏度测试

 图2：分别测试50 copies/T和25 copies/T两个拷贝数，测试结果表明在15min内，50 copies/T的结果表现更好，检出率达100%。

 

 

引物适用性

 

图3.N5锁核酸引物适应性检测

图4.N引物适应性检测

 

 

图5.ACTIN引物适应性检测

 

图3、图4：在N5锁核酸引物和N引物特异性检测中，按照50 copies/T进行，使用翌圣和N品牌进行对应的检测，结果显示，N5锁核酸引物适用性优于N品牌，N引物适用性两个产品基本一致。

图5：15ng的293DNA，采用翌圣和N品牌进行ACTIN引物适用性检测，结果显示翌圣适用性表现优异。

 

特异性

 

图6.48 孔NTC特异性检测 

图6：对产品的特异性检测中采用48孔NTC检测，不起峰，表明特异性较优。

 

耐受性

 

图7.核酸释放剂耐受性检测 

图7：采用100基质DEPC H20，核酸释放剂和DEPC H20各50%以及100%核酸释放剂分别进行检测，结果表明本产品对核酸释放剂的耐受性表现优异。

 

稳定性

      

 

 

图8.37℃热加速稳定性检测

图8：在37℃0天为对照，同温度下1、3、5天分别进行稳定性检测，表明其在37℃5天的情况下依然可以保持较为稳定的效果。

 

图9.-20℃反复冻融稳定性检测

 

 

图10.干冰反复冻融稳定性检测 

图10：在-20℃和干冰反复冻融稳定性检测发现，-20℃反复冻融10次，干冰反复冻融5次，其稳定性表现均优异。

 

同类产品对比

 

图11.同类产品效果比对

图11：以引物N基因引物，在50 copies/T的情况下，采用翌圣、品牌N1、品牌N2进行产品对比验证，翌圣产品表现优异。

 

冻干球

翌圣生物该款试剂已研发出同等性能的冻干球产品，更多产品性能验证正在进一步测试中，敬请期待。
 

 

图12.冻干球

 

产品信息

 

产品名称	产品编号
RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)	13762ES
RT-LAMP pH Sensitive Dyestuff Kit（pH敏感染料显色，可冻干版）	13906ES
新冠RT-LAMP检测预混液 RT-LAMP COVID-19 Primer Master Mix (N)	13995ES

其他相关产品信息

 

产品类别	产品名称	产品编号
Bst酶	Bst Phus DNA Polymerase(40 U/pL)	14402ES
	Bst Phus DNA Polymerase (2000 U/μL)	14403ES
热敏UDG	Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG),heat-labile,1U/pL	10303ES
	Hieff⑧Uracil DNA Glycosylase (UDG,Glyceol-free)无甘油UDG酶	10707ES
逆转录酶	Hifair⁸Ⅲ Reverse Transcriptase第三代耐热逆转录酶	11111ES
	HifairⅢ Reverse Transcriptase,600U/μl Glycerol-free第三代耐热逆转录酶(无甘油版)	11297ES
MRI抑制剂	Murine RNase inhibitor(40 U/μ)鼠源RNase抑制剂	10603ES
	Murine RNase Inhibitor(200 U/L)鼠源RNase抑制剂	10610ES
	Murine RNase Inhibitor(200 U/μL,Glycerol-free)	10703ES
dNTP	dNTP Mix(10 mM each)	10124ES
	dUTP,100mM Sohution脱氧尿苷三磷酸溶液(100mM)	10128ES
荧光染料	EveGreen(20×in water)	10223ES
	SYBR Green I(10,000×in DMSO)核酸凝胶染料	10222ES