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400-6111-883
Hieff Trans™ Universal Transfection Reagent Hieff Trans™通用型转染试剂
产品货号:40808ES02
产品规格:0.5 mL
产品价格:¥ 1165.00
类别:细胞转染

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  • 产品信息

     

    产品名称

    产品编号

    规格

    价格(元)

    促销价(元)

    Hieff TransTM Universal Transfection Reagent

    Hieff TransTM通用型转染试剂

    40808ES02

    0.5 mL

    1165.00

    685.00

    40808ES03

    1 mL

    2065.00

    1355.00

    40808ES08

    5×1 mL

    7985.00

    5275.00

     

    产品描述

     

    Hieff TransTM通用型转染试剂是基于新的纳米技术研发的一款多用途、便捷高效的脂质体转染试剂,适用于DNA、RNA和寡核苷酸的转染,对包括原代细胞、神经细胞在内的难转染细胞都具有较高的转染效率。其独特的配方使其可直接加入培养基中,血清的存在不会影响转染效率,这样可以减少去除血清对细胞的损伤。转染后不需要除去核酸-转染试剂复合物或更换新鲜培养基,也可根据细胞营养状态在4-6小时后更换新鲜培养基。

     

    产品组分

     

    组分编号

    组分名称

    规格/货号

    40808ES02

    40808ES03

    40808ES03

    40808-A

    Universal-A溶液

    0.5 mL

    1 mL

    5×1 mL

    40808-B

    Universal-B溶液

    0.5 mL

    1 mL

    5×1 mL

     

    运输与保存方法

     

    冰袋(wet ice)运输。产品2-8ºC保存,一年有效。不可冷冻!

     

    注意事项

     

    1) 转染操作时,以细胞融合度达70%-90%为佳,具体铺板密度根据细胞情况酌情而定。

    2) 制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释DNA和转染试剂。

    3) 转染的时候培养基中不能添加抗生素。

    4) 使用高纯度的DNA或RNA有助于获得较高的转染效率,质粒中的内毒素是转染的大敌。

    5) 2-8ºC保存,要注意避免多次反复长时间开盖。

    6) 初次使用应优化核酸浓度和试剂量以得到最高的转染效率。

    7) 本产品仅作科研用途!

     

    操作流程

     

    1. DNA转染

    注:转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响,建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。

    1) 细胞铺板,至转染操作时,以细胞融合度达70%-90%为佳。

    2) 按照下表使用Opti-MEM培养基稀释Universal-B溶液,轻轻混匀。

    3) 使用Opti-MEM培养基稀释DNA,得到DNA预混液,然后添加Universal-A溶液,轻轻混匀,得到稀释的DNA。

    4) 将稀释的DNA加入已稀释的Universal-B溶液(1:1比例)。

    5) 室温孵育5分钟。

    6) 将DNA-脂质体复合物逐滴加到细胞中,轻轻混匀。

    7) 37℃,5% CO2培养箱培养48-96 h,直至进行基因表达分析。

    2. siRNA转染

    转染siRNA操作与DNA的转染操作流程一样,但在稀释siRNA时则不需要加入Universal-A溶液(第3步)。

    不同细胞培养容器转染用量(仅供参考):

    培养皿

    96-well

    24-well

    6-well

    贴壁细胞

    1-4×104

    0.5-2×105

    0.25-1×106

    使用Opti-MEM培养基稀释Universal-B溶液,轻轻混匀。

    Opti-MEM培养基

    5 μL

    25 μL

    125 μL

    Universal-B溶液

    0.2 μL

    1 μL

    5 μL

    使用Opti-MEM培养基稀释DNA,得到DNA预混液,然后添加Universal-A溶液,轻轻混匀,得到稀释的DNA。

    Opti-MEM培养基

    5 μL

    25 μL

    125 μL

    DNA (0.5–5 μg/μL)

    0.1 μg

    0.5 μg

    2.5 μg

    Universal-A溶液(2 μL/μg DNA)

    0.2 μL

    1 μL

    5 μL

    将稀释的DNA加入已稀释的Universal-B溶液中(1:1比例)。

    稀释的DNA

    5 μL

    25 μL

    125 μL

    稀释的Universal-B溶液

    5 μL

    25 μL

    125 μL

    室温孵育5分钟

    DNA-脂质体复合物形成

    复合物成分(每孔)

    96-well

    24-well

    6-well


    Opti-MEM培养基

    10 μL

    50 μL

    250 μL


    DNA(0.5–5 μg/μL)

    0.1 μg

    0.5 μg

    2.5 μg


    Universal-B溶液

    0.2 μL

    1 μL

    5 μL


    Universal-A溶液

    0.2 μL

    1 μL

    5 μL

    将DNA-脂质体复合物逐滴加到细胞中,轻轻混匀。

    DNA-脂质体复合物

    10 μL

    50 μL

    250 μL


    【注】该表使用量仅供参考,DNA与Universal-B溶液具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。建议使用时比值保持在1:0.5-1:5之间。

     

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    名称

    货号

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    HB220520