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Polyethylenimine Linear (PEI) MW40000(rapid lysis) 线性PEI转染试剂(速溶型)MW40000
产品货号:40816ES02
产品规格:100 mg
产品价格:¥ 655.00
类别:细胞转染

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  • 产品信息

     

    产品名称  

    产品编号

    规格

    价格(元)

    促销价(元)

    Polyethylenimine   Linear (PEI) MW40000(rapid lysis)

    线性PEI转染试剂(速溶型)MW40000

    40816ES02

    100 mg

    655.00

    635.00

    40816ES03

    1 g

    1855.00

    1785.00

     

    产品描述

     

    PEI 40000是一种分子量为40000的高电荷阳离子聚合物,非常容易结合带负电荷的核酸分子,形成复合物,并使该复合物进入细胞中。PEI 40000是一种瞬时转染试剂,细胞毒性低,转染效率高,在HEK293和CHO等细胞中基因表达效率较高。目前已经验证线性PEI转染试剂广泛适用于多种细胞系包括HEK-293、HEK293T、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2和Hela细胞等,转染效率高达80%~90%。

    PEI 40000与PEI 25000转染试剂相比,具有很多优点。包括:1. PEI 40000较易溶解,可直接在水中溶解,PEI 25000需要先把水调成弱酸性助其溶解,溶解后再用NaOH把pH调至中性;2. PEI 40000操作简便,更易于使用,且比PEI 25000的转染效果好;3. PEI 25000含有4-11%的丙酰基残留,其能阻止聚合物主链与DNA结合。相较于PEI 25000,PEI 40000是完全脱落的结构,因此其性能始终高效如一。

    本产品为速溶型,溶解迅速,配制方便。

     

    产品性质

     

    中文名(Chinese Name)

    线性聚乙烯亚胺PEI 40000

    英文名(English Name)

    Polyethylenimine Linear (PEI) MW40000 

    CAS号(CAS No.)

    49533-93-7

    分子式(Molecular formula)

    (CH2CH2NH)n

    分子量(Molecular weight)

    40,000

    外观(Appearance)

    白色至灰白色固体

    溶解性(Solubility)

    溶于水,不溶于有机溶剂:苯,乙醚和丙酮

    结构式(Structure)

    image.png

     

    运输与保存方法

     

    运输方式:室温运输。
    保存方式:粉末在室温或4 ºC保存,有效期2年。储存液 在4 ºC保存,有效期3个月。

     

    注意事项

     

    1)对大多数细胞来而言,每1 μg DNA 使用3.0 μL PEI 40000转染试剂都能获得较高转染效率。也可尝试每1 μg DNA使用 1.5~4 μL体积线性PEI 40000转染试剂进行优化。

    2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套及通风橱操作。

    3)本产品仅用于科研用途,不可用于人体。

    储存液配置(1 mg/mL)

    1.材料

    PEI 40000、Milli-Q® 水/注射用水(WFI)或类似的生物级水、12 mol/L盐酸、1 mol/L氢氧化钠(NaOH)、一次性0.1~0.2 μm PES真空无菌过滤器、无菌HDPE或聚丙烯储存瓶。

    2. 配置储存液(1 mg/mL)

    1)于1 L玻璃烧杯,将1 g PEI 40000粉末加入900 mL Milli-Q®超纯水或其他相当级别的生物用水中,在磁子搅拌器上搅拌均匀。

    2)待PEI 40000完全溶解(通常不到5 min)。

    3)用盐酸(12 mol/L)或氢氧化钠(1 mol/L)溶液调节pH为6.80 - 6.90。

    5)将溶液转入量筒内,并加水定容到1 L。

    6)用一次性0.1~0.2 µm PES真空过滤器过滤除菌,即得到1 mg/mL的储存液。

    7)根据需要分装并储存在4 °C,3个月稳定。

    转染操作流程(以6孔板为例)

    1.接种细胞:为了提高转染效率,建议在转染前一天接种细胞,以转染时细胞密度在70%~80%为宜。

    2.准备DNA-PEI复合物:按照以下体系配制DNA-PEI核酸-转染试剂复合物:

    1)对于每孔细胞,使用100 μL无血清培养基稀释2 μg目的DNA,充分混匀成DNA稀释液。

    【注】无血清稀释液建议采用Opti-MEM或ddH2O

    2)立刻向100 μL的DNA稀释液中加入4 μL的PEI 40000转染试剂,轻轻混匀。

    3)在室温下孵育10~15 min,使得形成DNA-PEI阳离子核酸转染试剂复合物。

    3.转染细胞:

    1)在形成复合物过程中,移除细胞生长培养基,每孔中加入2 mL新鲜预热的完全培养基。

    2)直接将100 μL DNA-PEI核酸-PEI复合物加入细胞中,摇动培养板,轻轻混匀。

    3)37 ℃,5% CO2培养箱培养,转染后最快5 h即可检测到转入基因的表达。请自行确定适合检测时间。

    4.稳转筛选(可选)

    转染24 h后,将细胞传代至新鲜的生长培养基中(将细胞稀释10倍以上),37 ℃,5% CO2培养箱孵育过夜。第二天加入与转染抗性基因相匹配的筛选药物。约1~2周可筛选到耐药性克隆,在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。

    不同细胞培养容器转染用量(仅供参考):

    培养皿

    表面积(cm2

    DNA的量(μg)

    转染试剂的量(μL)

    稀释液体积(μL)

    培养基总量

    96孔板

    0.3

    0.1

    0.1

    10

    100 μL

    48孔板

    0.7

    0.2

    0.3

    20

    200 μL

    24孔板

    1.9

    0.5

    1

    50

    500 μL

    12孔板

    3.8

    1

    2

    50

    1mL

    6孔板

    10

    2

    4

    100

    2 mL

    25cm2培养瓶

    21

    4

    8

    200

    4 mL

    75cm2培养瓶

    58

    10

    20

    500

    10   mL

     

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    HB220722