1）根据纯化的样品量，取适量填料加入离心管中，1000 rpm 离心 1 min，吸弃上清;
2)向离心管中加入5 倍介质体积的平衡液清洗介质，1000 rpm 离心1 min，吸弃上清，重复两次以上。
3)加入样品，封闭离心管，4℃振荡孵育 2-4 h 或者37度孵育30 min-2h。
4)孵育结束后，1000 rpm 离心1 min，吸弃上清，上清保留作为流穿，用于电泳鉴定。
5)用5倍介质体积的洗杂液清洗介质，1000 rpm 离心1 min ，去除上清（注意不要吸到介质），重复 3-5次，中间建议更换新离心管。
6)加入3-5 倍柱体积的洗脱液进行洗脱，温育 5 min，1000 rpm 离心1 min可重复 2-3次。