一、TNFR家族中的OX40定位

OX40（TNFRSF4，CD134）是TNF受体超家族中的重要共刺激分子，与4-1BB、GITR、CD27等同属非死亡受体亚家族。OX40的独特之处在于其表达窗口较窄，主要限制于活化后的T细胞，且与4-1BB形成互补的时空表达模式：4-1BB在活化后24-48小时表达，而OX40在活化后48-72小时达到峰值。这种差异化表达使OX40成为调控T细胞应答后期阶段的关键靶点，特别是在T细胞存活、记忆形成和效应功能维持方面发挥不可替代的作用。

 

二、 分子特征与表达调控

1.OX40（TNFRSF4，CD134）

分子量为48-50 kDa，为I型跨膜糖蛋白。胞外域包含3个富含半胱氨酸的结构域（CRD1-CRD3），其中CRD2和CRD3参与配体结合。胞内域长约78个氨基酸，缺乏死亡结构域，但含有多个TRAF2/3/5结合位点和PI3K结合基序。表达调控具有严格的活化依赖性：静息T细胞不表达，TCR和CD28双信号刺激后48-72小时显著上调，峰值持续5-7天，随后逐渐下调。OX40在CD4⁺ T细胞上的表达水平高于CD8⁺ T细胞，与4-1BB的表达模式相反。此外，OX40表达于活化B细胞、NK细胞和NKT细胞，以及部分调节性T细胞（Treg）亚群。

2.OX40L（TNFSF4，gp34，CD252）

分子量为34 kDa，为II型跨膜糖蛋白，活性形式为同源三聚体。胞外TNF同源结构域负责受体结合。表达调控具有显著的诱导性：静息状态下仅低水平表达于专职抗原提呈细胞（树突状细胞、B细胞、巨噬细胞），炎症刺激后显著上调。LPS刺激可使树突状细胞OX40L表达增加5-10倍，CD40交联可使B细胞OX40L表达增加3-5倍。与4-1BBL不同，OX40L在非造血细胞如血管内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞中也可诱导表达，提示其在组织炎症中的广泛作用。

3.关键动力学参数

OX40与OX40L的结合亲和力经表面等离子共振测定，平衡解离常数Kd为0.2-1 nM，略高于4-1BB-4-1BBL相互作用。受体占位需超过20%即可产生显著共刺激效应，阈值低于4-1BB。OX40信号持续时间较长，可达5-7天，与T细胞克隆扩增和分化周期相匹配。

 

三、信号传导机制

1.正向信号传导（T细胞）

OX40与OX40L结合后，胞内域招募TRAF2、TRAF3和TRAF5蛋白，形成信号复合物。TRAF2激活NF-κB经典和非经典通路，分别促进抗凋亡基因（Bcl-xL、Bcl-2、A1）和细胞周期基因（cyclin D2、CDK4）的转录。PI3K/Akt通路通过OX40胞内域的YxxM基序被激活，促进葡萄糖摄取和糖酵解代谢，支持T细胞快速增殖。mTORC1信号被Akt下游激活，增强蛋白质合成和细胞生长。此外，OX40信号通过PKCθ激活AP-1转录因子，促进IL-2、IL-4、IL-5和IFN-γ等细胞因子产生。

 

2. 反向信号传导（抗原提呈细胞）

OX40L向表达细胞传递反向信号，促进树突状细胞产生促炎细胞因子IL-6和IL-12p40，增强抗原提呈能力。在B细胞中，OX40L反向信号促进生发中心反应和抗体类别转换。

 

3. OX40信号在T细胞应答中的阶段特异性作用

克隆扩增阶段

OX40信号在T细胞活化后期发挥关键作用。实验数据显示，OX40激动剂在TCR刺激后48-72小时添加效果最佳，此时内源性OX40表达达到峰值。该时段的OX40信号使CD4⁺ T细胞存活率提高3-5倍，克隆扩增增加2-3倍。与4-1BB早期信号形成协同：先4-1BB后OX40的序贯刺激使T细胞总数增加10-20倍，优于单独使用任一分子。

 

效应分化阶段（Th1/Th2/Th17/Tfh）

OX40信号对CD4⁺ T细胞亚群分化具有显著影响：

T细胞亚群	OX40作用	实验证据
Th1	中等促进，IFN-γ产生增加2-3倍	与IL-12协同增强细胞毒性
Th2	强促进，IL-4和IL-5产生增加5-10倍	哮喘和过敏模型中关键驱动因素
Th17	抑制，IL-17产生减少50%	通过上调IL-2抑制Th17分化
Tfh	强促进，Bcl-6表达上调3-5倍	生发中心反应必需信号
Treg	复杂作用，增强抑制功能但促进增殖	肿瘤微环境中双刃剑效应

 

记忆形成阶段

OX40信号促进效应记忆T细胞（Tem，CD62L⁻CCR7⁻）的产生和存活。与4-1BB促进中央记忆T细胞（Tcm）不同，OX40驱动的Tem细胞具有更强的即时效应功能，但持久性较短。过继转移实验显示，OX40刺激的Tem细胞在二次挑战后3天内产生强效保护，而4-1BB刺激的Tcm细胞保护延迟但持久。

 

Treg调控

OX40在Treg细胞上的表达使其成为Treg功能调控靶点。OX40激动剂可增强Treg的抑制功能，但同时促进Treg增殖，净效应取决于微环境。在肿瘤模型中，OX40激动剂通过增强效应T细胞功能克服Treg抑制，总体呈现抗肿瘤效应。

 

四．相关产品

OX40受体（TNFRSF4）重组蛋白产品

货号	产品名称	物种	标签	规格
93557ES	Recombinant Human OX40/TNFRSF4/CD134	Human	C-hFc	20ug/100ug/500ug/1mg
93705ES	Recombinant Human OX40/TNFRSF4/CD134 Protein	Human	C-His-Avi	25ug/100ug/500ug/1mg
96681ES	Recombinant Rat OX40/TNFRSF4/CD134 Protein	Rat	C-hFc	25ug/100ug/500ug
96680ES	Recombinant Cynomolgus OX40/TNFRSF4/CD134 Protein	Cynomolgus	C-hFc	25ug/100ug/500ug
93684ES	Recombinant Mouse OX40/TNFRSF4/CD134 Protein	Mouse	C-His-Avi	25ug/100ug/500ug
93608ES	Recombinant Biotinylated Human OX40/TNFRSF4/CD134 Protein	Human	C-His-Avi	25ug/100ug/500ug
93666ES	Recombinant Biotinylated Mouse OX40/TNFRSF4/CD134 Protein	Mouse	C-His-Avi	25ug/100ug/500ug
96089ES	Recombinant Human OX40/TNFRSF4/CD134 Protein	Human	C-hFc	25ug/100ug/500ug

OX40L配体（TNFSF4）重组蛋白产品

货号	产品名称	物种	标签	规格
95791ES	Recombinant Human OX40 Ligand/TNFSF4 Protein	Human	N-hFc	25ug/100ug/500ug
94541ES	Recombinant Mouse OX40 Ligand/TNFSF4 Protein	Mouse	N-hFc	25ug/100ug/500ug
96373ES	Recombinant Mouse OX40 Ligand/TNFSF4 Protein	Mouse	N-hFc	25ug/100ug/500ug
93005ES	Recombinant Biotinylated Human OX40L Protein	Human	N-His-Avi	25ug/200ug
94974ES	Recombinant Human OX40L Protein	Human	C-mFc	100ug/1mg
94156ES	Recombinant Cynomolgus OX40L Protein	Cynomolgus	N-His	100ug/1mg
93461ES	Recombinant Cynomolgus OX40L Protein	Cynomolgus	N-mFc	100ug/1mg

 

五、产品验证数据

 

Human OX40 on Bis-Tris PAGE under reduced condition. The purity is greater than 95%

 

The purity of Human OX40 is greater than 95% as determined by SEC-HPLC.

 

 Immobilized Human OX40 Ligand Trimer, His Tag at 1μg/ml (100μl/well) on the plate. Dose response curve for Human OX40, hFc Tag with the EC50 of 25.9ng/ml determined by ELISA (QC Test)

 

Loaded Human OX40, hFc Tag on ProA-Biosensor, can bind Human OX40 Ligand (Trimer), His Tag with an affinity constant of 0.16 nM as determined in BLI assay

93557ES#Recombinant Human OX40/TNFRSF4/CD134 数据展示