植物组织直扩PCR试剂盒含染料 PCR扩增试剂盒|Plant Tissue PCR Kit(With Dye)

Plant Tissue PCR Kit (With Dye) 植物组织直接PCR试剂盒

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产品介绍

Plant Tissue Direct PCR Kit (With Dye)植物组织直接PCR试剂盒是一款可直接对不同类型植物叶片进行PCR扩增的试剂盒，适应性广、稳定性强。试剂盒采用独特的裂解缓冲液体系，可以快速的裂解多种植物样品并释放出基因组DNA，不需要除去蛋白、RNA或次生代谢产物等，即可将释放出的基因组DNA作为模板直接用于PCR反应。此外，样品使用量少，低至1 mm植物叶片即可进行实验。

本试剂盒中提供的2× Plant Master Mix具有很强的扩增兼容性，能直接以待测样品裂解液为模板，进行高效特异性扩增。该试剂为2倍浓缩PCR反应混合液，包含了用于PCR扩增除模板和引物外的所有组分，大大简化操作过程，降低污染几率。且含有示踪染料，PCR产物可直接电泳。

该试剂盒可用于转基因植株鉴定、植物基因分型等。

产品特色

适应性广、稳定性强

应用案例

多类型植物样本验证

不同类型植物叶片直扩结果。M：100 bp DNA ladder。C：相应植物纯化基因组DNA为模板。1-2：叶片组织裂解产物为模板。循环数：30个循环。

存储条件

1. 试剂10187-A【Buffer P1】，置于2-8℃保存。有效期1年。

2. 试剂10187-B【Buffer P2】，中和裂解产物，利于更长时间保存样本，置于2-8℃保存。有效期1年。

3. 试剂10187-C【2 × Plant Master Mix】，-25~-15℃保存，避免反复冻融。有效期1年。

试剂盒有效期1年。

FAQ

常见问题	可能原因	解决方法
阳性对照、待测样本均无条带。	PCR反应体系或反应条件不合适。	使用梯度PCR摸索PCR最佳反应条件。
	PCR试剂保存不当失去活性。	2×PCR Mix应保存于-25~-15℃，使用时避免反复冻融。若使用频繁，可在2-8℃短时间存放。
	引物设计问题。	尝试重新设计引物进行检查。
阳性对照有目的条带，待测样本无条带或条带弱。	不当储存或长期储存引起试剂活性丧失。	使用新鲜的试剂。
	裂解液、中和液加入比例不当，裂解混合液影响PCR体系的pH值。	正常条件下，中和后的裂解混合液的pH应该在7-8左右（裂解产物和Buffer P2严格按照5:1的量进行中和）。
	样本裂解混合液保存不当或保存时间过久，DNA基因组已经降解。	裂解混合液可在2-8℃保存5天，尽量使用新制备的裂解液混合液进行PCR。
	模板加入量不适合。	在反应体系＜5%范围内优化模板加入量。
	PCR循环数不足。	适当增加PCR的循环数，推荐在35-40循环为佳。因为模板复杂，一般PCR反应要比用纯化的DNA模板多5-10个循环为佳。
非特异性扩增	PCR退火温度太低，循环数、引物浓度或模板浓度太高。	提高PCR退火温度，降低PCR循环数、引物浓度或模板浓度。
	PCR引物错配。	重新设计PCR引物。
	配制PCR反应体系时温度太高或配制完成后放置时间太久。	PCR反应体系的配制在低温下进行，配制完成后尽快进行PCR扩增反应。
阴性对照出现目的条带	操作工具或试剂污染。	实验所有试剂或器材均应高压灭菌。操作时应小心轻柔，防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外。
阴性对照出现目的条带	样本间交叉污染。	每个取样器只对一个样本使用；或取完一个样本后，将取样器刃口浸入2%的次氯酸钠溶液中，反复涮洗，然后用干净的纸巾擦干残液。