牛血清白蛋白应用及其残留质控

生物制品生产中经常会涉及到细胞培养或组织培养，在这些培养中胎牛血清被广泛应用，为细胞生长提供必须的营养成分，而胎牛血清中就包含了一定量的BSA（Bovine serum albumin，牛血清白蛋白）。

考虑到生产的药物的安全性，目前疫苗、抗体药物、组织工程产品以及细胞&GCT等生物制品的生产过程中，逐渐使用无血清培养基来替代含血清培养基，从而减少可能由血清带来的病毒污染等潜在危害。其中，无血清培养基多采用各种可以替代血清功能的生物大分子配制而成，例如牛血清白蛋白（BSA）、转铁蛋白和胰岛素。

由此，无论使用含血清培养基还是无血清培养基，都会有BSA。虽然在生产中经过纯化等步骤去除了大部分的杂质蛋白，但仍然会有微量的外源蛋白（如BSA等）存在于最终的生物制品中。BSA作为外源蛋白进入人体后可能引起严重过敏反应，从而影响生物制品的安全性。所以BSA检测项目是生物制品生产工艺中重要的质量检测指标之一。

牛血清白蛋白残留风险及法规监管要求

使用含BSA的血清或者无血清培养基进行生物制品生产时，必须对中间品和终产品等高度纯化。尽管如此，这些产品的制造和纯化过程还是会不可避免的留下BSA杂质。这些杂质可导致不良的毒性或免疫反应，因此最好将牛血清白蛋白的杂质降低到实际使用的最低水平。各国法规都有涉及BSA的论述，要求必须对生物药品进行分析和纯化，以将BSA降低到可接受的水平。

2020版《中国药典》（三部）对各种疫苗中BSA残留量进行明确规定，基本是不高于50ng/mL或不高于50ng/剂。
《美国药典》要求生物制品中BSA残留的限制为50 ng/dose或500 ppm。
《欧洲药典》要求生物制品中的BSA残留的限制为0.1至1.0 μg/dose。
2022年CDE发布的《免疫细胞治疗产品药学研究与评价技术指导原则（试行）》：在进行常规外源因子检测的基础上，根据可能引入的外源因子，可结合体内和体外方法开展特定外源因子的检测。例如，生产中若使用牛血清，需进行牛源特定病毒的检测。
2023年CDE发布的《基因治疗制品质量控制研究考虑要点》中，也明确要求对制剂制备过程中残余的牛血清白蛋白进行检测。

牛血清白蛋白（BSA）残留检测方法

目前常见的BSA残留的检测方法有：免疫扩散法、免疫电泳法、表面等离子共振法以及酶联免疫吸附测定法（ELISA法）这四种。其中，ELISA法由于操作简便、快速、高灵敏、高通量、低成本等特点，已成为行业内普遍使用的方法。并且2020年版《中国药典》三部通则3411中提到的采用酶联免疫吸附法测定供试品中残余牛血清白蛋白（BSA）含量。

翌圣生物依托相关法规，从市场需求出发，自主研发了牛血清白蛋白（BSA）残留量检测试剂盒。试剂盒采用双抗夹心酶联免疫检测（ELISA）的实验原理，以及辣根过氧化物酶（HRP）信号放大系统，能够高灵敏的检测样本中牛血清白蛋白残留量。试剂盒可以用于生物制品纯化工艺过程的优化、中间工艺过程的杂质控制以及终产品的放行检测。

产品参数

项目	参数性能
实验原理	双抗夹心ELISA法
信号放大	抗体+抗原+抗体-HRP复合物（两步法）
检测波长	450nm和630nm
实验时长	＜3 h
检测范围	1.5625~50ng/mL
标准品溯源	溯源至国家标准品
准确性	样本加标回收率80%~120%
精密度	批内重复性CV＜10%，批间差CV＜15%
灵敏度	定量下限(LLOQ)分别为1.5ng/mL，检测下限(LLOD)分别为0.5ng/mL
适用机型	Molecular Devices：M和i系列
应用	检测疫苗、抗体药物、组织工程产品以及细胞基因治疗药物等生产过程中的BSA残留量

产品信息

产品	货号	品名	规格
牛血清白蛋白（BSA）检测试剂盒	36722ES	BSA ELISA Kit 牛血清白蛋白ELISA检测试剂盒	96T

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