Hieff UNICON® Advanced qPCR SYBR Master Mix是2×实时定量PCR扩增的预溶液,具有荧光强度高,灵敏度高和特异性强,扩增产量高等特点,颜色为蓝色,具有加样示踪的作用。核心组分Hieff UNICON® Taq DNA聚合酶采用抗体法热启动,可以有效抑制样品准备过程中引物退火导致的非特异性扩增。同时配方添加了提升PCR反应扩增效率因子和均衡不同GC含量(30~70%)基因扩增的促进因子,使定量PCR可以在宽广的定量区域内获得良好的线性关系。
- 特异性高:抗体法热启动&Buffer优化,最大程度减少二聚体生成
- 灵敏度高:可有效检测低拷贝数模板
- 高荧光值:荧光信号值更高,曲线线型更好,信噪比更高
- 精密度好:可精准区分2倍模板差异,复孔间差距小
- 多平台适用:适用于多种qPCR仪器,无需调整ROX浓度
- 特异性高
图.以人源cDNA为模板,扩增56组不同GC含量的基因片段(部分曲线如上方展示),结果显示,11185ES的特异性优于其他品牌,数据统计显示11185ES在这些样本中非特异性概率约为5.4%,其他品牌在同种样本中的非特异性概率约为53.6%。
- 灵敏度高
图.分别在不同类型仪器上以101-107拷贝的IL23R质粒为模板,扩增IL23R基因。结果显示在不同浓度模板下,11185ES的灵敏度更加优秀,Ct值更小,同时荧光平台期更高,曲线线型更好,信噪比更高。
- 精准区分2倍模板差异
图.分别以稀释10倍、20倍、40倍、80倍、160倍、320倍、640倍的人源cDNA为模板,扩增人GAPDH基因。测试结果显示11185ES能有效区分2倍模板浓度差异。
*备注:模板浓度差5倍,Ct值则相差2.322,22.322=5
图.分别以人源cDNA原液稀释了20倍、100倍和200倍的cDNA为模板,扩增60%GC含量的基因片段。数据显示11185ES针对不同浓度模板的分辨率优于其他品牌,且荧光值更高,曲线线型更好,信噪比更高。
-25~-15℃避光保存,有效期18个月。
Q: 为什么扩增产物跑胶会有拖尾的现象?
A: 试剂中本身含有稳定性成分,本身不参与任何反应,稳定剂成分在电泳胶上面会表现出弥散状,不建议跑完后再电泳。
Q: 试剂比较粘稠,容易产生气泡,如何避免?
A: 可以先混合大体系,再分别加到离心管里面,最后加模板;
枪头加样不要把空气打进去,二档吸样,一档打样品;缓慢推出液体,不要吹打;沿着壁打入到孔内;
另外配置完后,如果还有气泡,离心PCR管去除。如果是96孔板,移液完后轻轻敲96孔板。
Q:为什么从冰箱中拿出有淡黄色沉淀,还可以使用吗?
A:这个沉淀是稳定剂冻存后析出形成的,可以解冻后上下颠倒,枪头吹打混匀至沉淀消失,多混一会,不影响使用的,是正常情况。