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Strep(Ⅱ)Sep Agarose Purification Resin 4FF Strep(Ⅱ)标签蛋白琼脂糖纯化树脂
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20495ES08
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20495ES25
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产品介绍

Strep-Tag II为8个氨基酸的小标签(WSHPQFEK),由于标签小,仅为1.06 kDa左右,不影响融合后蛋白质的结构和功能,因此无需去除该标签。其特异性高,单步纯化纯度高,纯化条件温和,蛋白两端均可融合等突出特点迅速得到了广泛应用。Twin Strep-Tag II是一个顺序排列的两个Strep-Tag II序列(通过内部氨基酸连接),该标签能够像Strep-Tag II一样进行温和、快速的纯化。

翌圣目前可提供Strep(Ⅱ)标签蛋白琼脂糖纯化树脂(Cat#20495ES)和Strep(Ⅱ)标签蛋白琼脂糖纯化树脂(耐生物素版)(Cat#20795ES),产品区别请参考下表:

     

产品货号20495ES20795ES
产品名称Strep(Ⅱ)Sep Agarose Purification Resin 4FF
Strep(Ⅱ)标签蛋白琼脂糖纯化树脂
Strep(Ⅱ)Sep Plus Agarose Purification Resin 4FF
Strep(Ⅱ)标签蛋白琼脂糖纯化树脂(耐生物素版)
基质高度交联的4%琼脂糖凝胶高度交联的4%琼脂糖凝胶
配体链霉亲和素(Streptavidin)的突变体(二代)链霉亲和素(Streptavidin)的突变体(三代)
与Strep II标签结合能力3-5 mg Twin Strep-Tag II蛋白/mL 基质8-10 mg Strep-Tag II 蛋白/mL 基质
与生物素结合能力与生物素结合较牢固,样品中少量D-生物素就会影响Strep II 标签蛋白与链霉亲和素(Streptavidin)的突变体(二代)的结合效果。与生物素的亲和力大幅削弱,样品中低浓度(50 μmol/L)的D-生物素不会影响 Strep II 标签蛋白与链霉亲和素(Streptavidin)的突变体(三代)的结合效果。
洗脱方面使用脱硫生物素作为洗脱液,1 mM HABA或0.1 M NaOH再生前后载量变化较小。使用D-生物素作为洗脱液,需使用高浓度NaOH(1 M)再生,再生后载量只能达到初始载量的50%左右,对填料损害较大。可以使用D-生物素进行洗脱,且使用后可采用 10~50 mM NaOH 进行再生,再生前后载量变化较小。

         

Strep(Ⅱ)标签蛋白琼脂糖纯化树脂对Strep II标签具有高度特异性,一般只需一步纯化就能获得高纯度的蛋白质样品。可用于各种表达系统,包括杆状病毒、哺乳动物细胞、酵母和细菌中含有 Strep-Tag II 标签蛋白纯化,同时该树脂也可用于Twin Strep-Tag II 标签纯化。

【重要提示】由于真核表达体系内有游离生物素,游离生物素会和Streptavidin的突变体(二代)结合,影响蛋白挂柱效果,故使用本品进行真核表达蛋白纯化时,需事先对样品进行透析换液。也可直接选择Strep(Ⅱ)标签蛋白琼脂糖纯化树脂(耐生物素版)(Cat#20795ES),可以耐受样品中低浓度(50 μmol/L)的D-生物素。

翌圣Strep(Ⅱ)Sep Agarose Purification Resin 4FF储存在20%乙醇中,凝胶和保护液的比例为1:1,我司产品规格为实际凝胶的体积。

翌圣为您提供蛋白纯化实验整体解决方案,相关产品选购请参考:蛋白纯化系列产品-选购指南

产品特色
基质高度交联的4%琼脂糖凝胶
配体链霉亲和素(Streptavidin)的突变体(二代)
粒径45-165 µm
载量3-5 mg Twin Strep-Tag II 蛋白/mL 基质
最大流速300 cm/h
储存缓冲液含20%乙醇的1×PBS


存储条件

冰袋运输。2~8℃保存,有效期2年。

FAQ

Q:用脱硫生物素洗脱,除了用HABA再生以外,还可以用氢氧化钠再生吗?可以重复使用几次?

A:使用脱硫生物素作为洗脱液,用1 mM HABA或低浓度氢氧化钠(0.1 M)可再生10次左右。

Q:这个产品可以用D-生物素洗脱吗?

A: 可以用,但是用D-生物素洗脱后必须用高浓度氢氧化钠再生,重复使用时载量会明显变低。所以如果填料需要重复使用就必须用脱硫生物素洗脱。

Q:这个产品属于第几代?

A: 我们此款产品属于第二代。第三代填料的洗脱液可用D-生物素,能在低浓度生物素或者变性等特殊条件下结合Strep标签蛋白,再生方法可用氢氧化钠再生且重复使用效果较好。第三代产品是Strep(Ⅱ)标签蛋白琼脂糖纯化树脂(耐生物素版)(Cat#20795ES

Q:这个产品耐压多少?

A: 填料耐压0.3 MPa。

Q:如果我的Strep-Tag II 标签是位于我融合蛋白的中间位置可以用这个树脂吗?

A: 取决于标签的暴露情况

Q:如果用蛋白洗脱不下来,那怎么办?

A: 在洗脱液中加终浓度0.1%-0.5%Triton X-100,室温混合孵育30min。

Q:一个 beads上大概有多少个strep-tag II 的结合位点?我想知道这一个beads上能负载多少个蛋白?

A: 1 mL微球上的strep-tag II结合位点约为1.8×10^17个,1 mL填料中的微球颗粒数约为1×10^6。

Q:用HABA再生后填料变色并洗不白,如下图。

A: 这个是HABA和配体结合,可以平衡后直接上样,strep标签蛋白会将HABA竞争下来

Q:填料配基的分子量是多大?

A: 15 kDa

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