UCF.ME 低温活性 rTEV 蛋白酶，4℃高效切除蛋白标签
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2026-05-22
随着蛋白质组学技术的迅猛发展，重组蛋白的使用在近年来大大增加，为了提高重组蛋白的产量或赋予重组蛋白新的特性（这些特性可以用来对重组蛋白进行纯化或检测），可以在克隆过程中添加额外的标签到目标蛋白的N端或者C端，标签可根据功能分为两类，纯化标签和可溶性标签，纯化标签可用于亲和层析，快速纯化蛋白；可溶性标签用于促进蛋白质的正确折叠，增加可溶性。常见标签的功能可参考下表。
表1. 常见融合标签功能及酶切手段介绍
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融合标签 |
大小(KD) |
功能 |
常见酶切手段 |
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His |
0.84 |
有利纯化，能纯化可溶性/包涵体蛋白。 |
TEV蛋白酶 |
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Flag |
1.01 |
被高度特异的抗Flag抗体精准识别，可用于蛋白纯化，也适合Western Blot、免疫沉淀（IP）和免疫荧光检测。 |
肠激酶 |
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GST |
26 |
增强蛋白可溶性，仅能纯化可溶性蛋白，屏蔽毒性蛋白。 |
3C蛋白酶/凝血酶 |
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MBP |
44.4 |
增强蛋白可溶性，屏蔽毒性蛋白。 |
TEV蛋白酶/凝血酶 |
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SUMO |
11.2 |
增强蛋白的可溶性，促进蛋白折叠，保护蛋白免受蛋白酶水解，提高蛋白的稳定性。 |
SUMO酶 |
GST、MBP、SUMO等蛋白标签由于分子量较大，通常需要去除，以消除其对目标蛋白的结构与功能的影响；多肽标签（如His、Flag）分子量较小，免疫原性较低，基本不影响蛋白质的结构和功能，通常可以不用去除，但用于结构生物学或其他较高级研究的蛋白通常也要将小分子量多肽标签去除，以达到最佳效果。因此，当这些标签在完成其初始辅助功能后，去除这些不再需要的融合标签变得至关重要。
今天，我们隆重向您推介一款适合在低温条件下去除融合标签的尖端产品——UCF.ME® Cold-Active rTEV Protease，尤其适用于热敏感蛋白，可避免高温对蛋白的影响。
TEV Protease 是一种用来切割融合蛋白上亲和标签的常用蛋白酶，以其高度的位点特异性而著称。它严格识别七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S)，在谷氨酰胺和甘氨酸或丝氨酸之间进行精确剪切，其中最常见的七氨基酸序列为：Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。这种特异性确保了蛋白加工过程中的精确性和效率。
图1. TEV蛋白酶作用原理图
重组型TEV酶（rTEV）在pH 6.0-8.5和温度4-30℃的广泛范围内皆有活性，最佳活性在pH 7.0，30℃时可达到。翌圣UCF.ME® Cold-Active rTEV Protease 是一款经过基因工程改造的重组蛋白酶，它不仅保留了天然TEV酶的完整功能活性，且在低温（4-10℃）相较于常规重组TEV酶（Cat#20427ES）表现出更强的酶切活性，尤其适用于热敏感蛋白。
1. 本产品可用于特异性切割各类N端融合Tag（如His、GST、MBP或其他标签），尤其适用于双标签（N端Tag、C端His）融合的切割，
即：N端Tag（TEV site)↓-目的蛋白-C端His（需保留）。
2. 应用于切割病毒表面抗原（如新冠病毒刺突蛋白）的融合标签，提高抗原纯度与免疫原性 。
3. 抗体偶联药物（ADC）：精准切除连接肽，控制药物释放位点，提升疗效与安全性 。
4℃酶切活性测试：
以含有TEV蛋白酶剪切位点的融合蛋白（2 μg）为底物，分别投入UCF.ME® Cold-Active rTEV Protease（20957ES，1.6、1、0.5 U）、
UCF.ME® rTEV Protease（20427ES，3、2.5、2、1.6 U），在4℃条件下酶切18 h，蛋白电泳检测剪切效果。
图2. 20957ES与20427ES酶切活性对比（4℃，18 h）
结果对比：
20957ES投入1.6 U，酶切效率即可达到＞85%。
20427ES投入1.6 U，酶切效率仅达到~60%，需加大酶量至2.5 U，酶切效率方可达到＞85%。
结论：
Cold-Active rTEV Protease（20957ES）在低温（4℃）的酶切活性显著优于重组TEV酶（20427ES），能够以更低酶量实现更高酶切效率。
30℃酶切活性测试：
以含有TEV蛋白酶剪切位点的融合蛋白（3 μg）为底物，分别投入UCF.ME® rTEV Protease（20427ES，10、5、3 U），
在30℃条件下酶切1 h，蛋白电泳检测剪切效果。
图3. 20427ES酶切活性验证（30℃，1 h）
结论：翌圣的UCF.ME® rTEV Protease（20427ES）在投入量为3 U以上时，可高效剪切底物，剪切效率＞90%。
ISO认证超洁净分子酶生产基地-UCF.ME，基地配备工业级AKTA纯化与理化分析设备、百升级高密度发酵机组、万级标准洁净车间和自动化生产线。拥有 5L、10L、30L、100L、500L 和 1,500L 等不同规格的发酵纯化系统，在分子酶产业化领域具备从 5L 到 1,500L 的逐级放大生产能力，可充分满足下游客户在研发、中试与大规模生产等不同阶段的核心酶原料需求。
翌圣拥有强大的研发团队和先进的酶生产基地，通过不断的技术创新和优化，持续推出满足客户不同酶切需求的重组TEV蛋白酶，提供不同规格和级别的产品，满足客户的不同生产阶段的各种需求。已推出的UCF.ME® Cold-Active rTEV Protease（20957ES）、UCF.ME® rTEV Protease（20427ES）请客户根据目的蛋白需求的酶切温度进行选择！！
翌圣融合标签切割蛋白酶产品推荐
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产品类型 |
产品名称 |
货号 |
规格 |
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TEV蛋白酶 |
UCF.ME® Cold-Active rTEV Protease (5 U/μL) |
1 KU |
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UCF.ME® rTEV Protease (5 U/μL) |
1 KU/10 KU/50 KU |
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肠激酶 |
UCF.ME® Recombinant Enterokinase（His Tag） 重组肠激酶(His标签) |
100 U/500 U/ 5000 U/100 KU/ 1 MU（1000 KU） |
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UCF.ME® Recombinant Enterokinase GMP-grade（His Tag） GMP级重组肠激酶(His标签) |
5000 U/100 KU/ 1 MU（1000 KU） |
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SUMO蛋白酶 |
SUMO Protease |
100 U/500 U/ 1000 U |
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3C蛋白酶 |
3C Protease |
100 U/500 U/ 2× 500 U |
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凝血酶 |
Bovine Thrombin, High Specific Activity, >2000 IU/mg 牛凝血酶（高活力，>2000 IU/mg） |
1 KU/2 KU |
