本试剂盒基于比色法，以乙酰辅酶A和胆碱为底物，在ChAT的作用下，反应的生成物与显色剂结合，通过在324 nm处测定吸光度来计算ChAT的活力。适用于组织样本等的ChAT活性的测定，为研究神经系统功能提供重要参数。
产品信息
| 货号 | 60439ES40 |
| 规格 | 40 T |
| 检测范围 | 0.01-1.2 U/mL |
组分信息
| 组分编号 | 组分名称 | 装量 | 储存条件 | 备注 |
| 60439ES-A | 试剂一 | 液体 6 mL×1瓶 | 2℃～8℃ | Part1 |
| 60439ES-B | 试剂二 | 粉剂×1支 | -25℃～-15℃ | Part2 |
| 60439ES-C | 试剂三 | 粉剂×1支 | -25℃～-15℃ | Part2 |
| 60439ES-D | 试剂四 | 液体×1支 | 2℃～8℃ | Part1 |
| 60439ES-E | 试剂五 | 液体×1支 | 2℃～8℃ | Part1 |
| 60439ES-F | 试剂六 | 液体×1支 | 2℃～8℃ | Part1 |
| 60439ES-G | 试剂七 | 液体×1支 | 2℃～8℃ | Part1 |
备注：
1）试剂一室温低时会有结晶析出，测试前37℃水浴至澄清。
2）试剂二临用前加220 μL的蒸馏水，充分溶解；用不完的试剂-25℃～-15℃以下保存。
3）试剂三临用时每支加双蒸水440 μL，用不完的试剂-25℃～-15℃以下保存。
4）试剂四临用前每支用双蒸水1:1 稀释，2℃～8℃保存。
使用说明
1.仪器试剂准备
可调324 nm波长的紫外光分光光度计、1 cm光径石英比色皿，涡旋混匀器，离心机，37℃水浴锅，蒸馏水，生理盐水，蛋白测定试剂。
2.样本前处理
10%匀浆液的制备：准确称取组织重量，按重量（g）：体积(mL)=1：9 的比例，加入 9 倍体积的生理盐水，2500转/分，离心10分钟，取上清液，再用生理盐水2倍稀释后测定。
3.操作表
| 试剂 | 测定管 | 对照管 |
| 试剂一(μL) | 105 | 105 |
| 试剂二(μL) | 5 | 5 |
| 试剂三(μL) | 10 | 10 |
| 试剂四(μL) | 10 | 10 |
| 试剂五(μL) | 10 | 10 |
| 试剂六(μL) | 10 | 10 |
| 混匀，37℃水浴预温5分钟 | ||
| 5%的组织匀浆上清 | 25 | (煮沸的匀浆上清)25 |
| 混匀，37℃水浴20分钟，100℃沸水水浴2分钟终止反应 | ||
| 蒸馏水(μL) | 425 | 425 |
| 混匀，4000转/分，离心10分钟后取上清进行显色反应 | ||
| 上清(μL) | 500 | 500 |
| 试剂七(μL) | 10 | 10 |
| 混匀，静置15分钟，在324 nm处，用1 cm光径，2 mm内径的石英比色皿，蒸馏水调零，测定各管的吸光度值 | ||
4.计算公式
酶单位定义：在pH7.2条件下，37℃时每克组织(或每克组织蛋白)每分钟转移1 μmol乙酰基给胆碱的能力定义为一个酶活力单位。
1）以组织质量计算
ChAT活力(U/g组织) = (A测定-A对照) × V反总 ÷ (1.98×10-2 × T × V样 × W) × V样总
2）以蛋白含量计算：
ChAT活力(U/mgprot) = (A测定-A对照) × V反总 ÷ (1.98×10-2× T × V样 × Cpr)
其中：T：表示反应时间，20分钟；V反总：表示反应体系总体积，600 μL；1.98×10-2：表示呈色物消光摩尔系数1.98×10-5×比色光径(1cm)×1000；V样：表示取样量，25 μL；W：表示样本质量，g；V样总：表示提取液总体积，mL；Cpr：表示组织匀浆蛋白浓度，mgprot/mL（prot指蛋白）。
2℃～8℃保存，有效期3个月。
