本试剂盒为葡萄糖氧化酶法（GOD-POD）测定葡糖糖含量，可以用于不同样本的葡萄糖含量测定。液体样本（参照血清操作和计算方法），固体样本（参照组织、细胞的操作及计算方法），主要用于酶标仪测定葡萄糖含量。

产品信息

组分信息

本产品是一种基于酶法的检测工具，用于定量测定葡萄糖含量。

研究应用：

1. 样本处理：样本需按要求处理，避免干扰物质影响检测结果。
2. 试剂保存：试剂需在指定条件下保存，避免反复冻融。
3. 操作规范：严格按照说明书操作，确保结果准确可靠。

使用说明

1. 样本处理
2. 血清(或肝素抗凝血浆)：直接测定，如超过线性范围用生理盐水推荐（Cat# 60372）稀释后测定。
3. 培养液样本：吸取培养液，1000转/分，离心10 min，取上清测定。一般建议细胞密度在100万个/mL以上。
4. 组织样本：准确称取组织重量，按重量(g)：体积(mL)=1：9的比例，加入9倍体积的生理盐水（或PBS），冰水浴条件下机械匀浆，2500转/分，离心10 min，取上清液待测。
5. 细胞样本：建议收集的细胞密度在100万个/mL以上。破碎好的液体可显微镜观察细胞是否破碎完全。

• 细胞收集：将制备好的细胞悬液取出，1000转/分，离心10 min，弃上清液，留细胞沉淀。用等渗缓冲液（推荐Cat# 60152 D-PBS，不含钙、镁离子，1X）清洗1~2次，同样1000转/分，离心10 min，弃上清液，留细胞沉淀；
• 细胞破碎：加入0.2~0.3 mL的匀浆介质（推荐Cat# 60152 D-PBS，不含钙、镁离子，1X）进行匀浆，冰水浴条件下超声破碎(功率 300W，3~5 s/次，间隔30 s,重复3~5次)或手动匀浆，制备好的匀浆液不离心直接测定。也可采用裂解液裂解(推荐推荐Cat# 20107 Triton X-100, Molecular Biology Grade 曲拉通X-100（分子生物学级），1～2%，裂解30~40 min)，裂解好的液体不离心直接测定。

2.  操作表

表1  96孔板加样方法（酶标仪比色测定）

轻轻振荡孔板，37℃孵育10 min，波长505 nm， 酶标仪测定各孔吸光度值。

3.  计算公式

1. 血清等液体样本计算公式

酶标仪比色:  

C标准:标准品浓度,5.55 mmol/L(具体浓度以标签为准)

2.  组织、细胞计算公式（组织、细胞不建议使用生化分析仪测)

蛋白浓度(Cpr,单位 g/L)可使用考马斯亮蓝法、BCA法测定

2~8℃避光保存，有效期1年。

Q：可以检测培养基吗？

A：可以的，但是酚红会有影响，建议做对照扣除，培养基并进行适当的稀释。

Q：该试剂盒的组分A的工作液是否含有酶和显色剂呢？

A：是的。该试剂盒是GOD-POD方法，原理是葡萄糖氧化酶GOD利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸并释放过氧化氢，而过氧化物酶POD在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，该工作液中除含有POD和GOD外，还有色原性氧受体：4-氨基安替比林4-AAP，POD催化4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。

Q：可以检测食品中的葡萄糖吗？

A：不推荐用于食品中葡萄糖的检测。