本试剂盒测定原理如下：脂质过氧化物（LPO）在45℃反应60分钟的条件下，一分子脂质过氧化物（LPO）和两分子的显色试剂反应，产生一种稳定的生色团，在586 nm下有最大吸收峰。通过标准曲线对照或公式计算可得到检测物中脂质过氧化物（LPO）的含量。该方法的优点包括快速简便，适用于检测动物血清/浆、组织等样本中的脂质过氧化物（LPO）含量。
产品信息
| 货号 | 60431ES50/60431ES60 |
| 规格 | 50 T/100 T |
组分信息
| 组分编号 | 组分名称 | 50 T | 100 T | 储存条件 |
| 60431ES-A | 基质贮备液 | 30 mL×1瓶 | 60 mL×1瓶 | 2～8℃ |
| 60431ES-B | 基质稀释液 | 10 mL×1瓶 | 20 mL×1瓶 | 2～8℃ |
| 60431ES-C | 显色剂 | 10 mL×1瓶 | 18 mL×1瓶 | 2～8℃ |
| 60431ES-D | 标准液（10μmol/L） | 5 mL×1瓶 | 5 mL×1瓶 | 2～8℃ |
备注：
试剂一应用液配制：将基质贮备液和基质稀释液按3:1体积比混合，现用现配。
使用说明
1.仪器试剂准备
含586 nm波长的酶标仪、96孔板、45℃水浴锅或恒温箱、沸水浴锅、台式低速离心机、各种规格移液器、蒸馏水、涡旋 混匀器、试管或离心管、蛋白测定试剂。
2.样本前处理
1）组织样本：
准确称取组织重量，按重量(g)：体积(mL)=1:9 的比例加入生理盐水，冰水浴匀浆，2500 转/分，离心10分钟，取上清液检测。
2）血清/浆样本：
直接检测。
3）细胞样本：
贴壁细胞：用细胞刮配合等渗PB刮下或用胰酶消化下来（消化后加入0.5-1 mL等渗PBS冲洗），再将细胞悬液转移到另一离心管中，1000转/分，离心10分钟，弃上清液，留细胞沉淀；用等渗缓冲液（推荐0.1 mol/L 、pH 7～7.4磷酸盐缓冲液）清洗1～2次，同样1000 转/分，离心10分钟，弃上清液，留细胞沉淀（若不立即测定，可直接放-20℃或-80℃冰箱保存，3个月内可用）；往细胞沉淀中加入0.2～0.3 mL的匀浆介质（推荐0.1 mol/L pH 7～7.4的PBS或生理盐水）（加完匀浆介质后轻轻混匀细胞溶液，使其均匀，吸取少量进行细胞计数；若是破碎后可以测蛋白，则不用细胞计数），冰水浴条件下超声破碎(功率：300W,3～5秒/次,间隔 30 秒，重复3～5次)或手动匀浆，制备好的匀浆液若比较均匀可不离心直接测定。也可采用裂解液裂解(推荐TritonX-100，1～2%,浓度0.1-0.2 mL裂解30～40 分钟)，裂解好的液体可不离心直接测定。
[注]：建议细胞数在100 万个以上（越多测定效果越好），破碎好的液体可显微镜观察细胞是否破碎完全。
3.操作表
取所需数量的1.5mL带盖的离心管，编号后按下表进行操作：
| 试剂 | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
| 无水乙醇(μL) | 200 | - | - |
| 10 μmol/L标准品(μL) | - | 200 | - |
| 样本(μL) | - | - | 200 |
| 试剂一应用液(μL) | 650 | 650 | 650 |
| 盖上盖充分混匀。 | |||
| 显色剂(μL) | 150 | 150 | 150 |
| 盖上盖，涡旋混匀，45℃孵育60分钟，4000转/分，离心10分钟，取上清液200 μL加入到96孔板中，586 nm波长，酶标仪测定各孔吸光值A。 | |||
4.计算公式
1）血清样本计算公式
血清（浆）中LPO含量(μmol/L) = (A测定-A空白)/(A标准-A空白) × C标准
2）组织样本计算公式
组织中LPO含量(μmol/gprot) = (A测定-A空白)/(A标准-A空白) × C标准/Cpr
3）细胞样本计算公式
细胞中LPO含量(μmol/104个细胞) = (A测定-A空白)/(A标准-A空白) × C标准 × V/细胞数
其中：C标准：表示标准液浓度，10 μmol/L；Cpr：表示匀浆液蛋白浓度，gprot/L（prot指蛋白）；细胞数：表示细胞破碎时的细胞总数，万个；V：表示细胞破碎时加入的匀浆介质的总体积，L。
[注]：细胞样本计算时，也可以用组织样本的计算公式。
2～8℃保存，有效期1年。
