进行加A尾法逆转录时候,如何避免miRNA前体的干扰?
进行加A尾法逆转录时候,如何避免miRNA前体的干扰?
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2026-10-10
由于加A尾这一步不特异,可以在定量的时候,在上游引物3’端增加1 ~ 3个A碱基可以避免miRNA前体的非特异扩增,因为前体和成熟体的mirna的5端是一样的不好区分,主要看3端,miRNA加尾后有A,所以引物设计的时候包含几个A进去,可以提高特异性。
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