MDA/RCA 扩增产物非常粘稠是什么原因？如何处理适配下游实验？
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2026-09-17
粘稠属于正常阳性现象：UniPhi29 强持续合成活性产生数十 kb 级高分子量分支 DNA，分子量越大粘稠度越高。标准化处理方案：
- 稀释操作：电泳、Qubit 定量、磁珠纯化前用无核酸酶水稀释 2–10 倍，显著降低粘稠度；
- 电泳验证处理：RCA 产物使用对应限制性内切酶单一位点切割，打散长串联多联体，获得清晰均一条带；
- NGS 建库前处理：Covaris 超声打断至 200–500 bp 文库目标片段；
- 扩增阶段缓解：体系添加 0.1 U/μL 无机焦磷酸酶，从源头降低粘稠度，同时提升扩增产量。
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