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RNA电泳可以使用DNA Marker吗?

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2026-07-06

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准备进行RNA电泳时,发现手边只有DNA Marker。RNA和DNA都是核酸,看起来差不多,那DNA Marker能用来指示RNA大小吗?还是说必须购买专门的RNA Marker?这个问题看似简单,但涉及RNA与DNA在结构、构象和电泳行为上的本质差异。本文将详细解释这些差异,告诉你什么情况下可以凑合用,什么情况下必须严格区分。

原则上RNA电泳是不能直接使用DNA Marker的。

RNA和DNA的结构存在显著差异。DNA主要呈双螺旋结构,而RNA通常是单链。且RNA可以折叠形成复杂的二级结构,比如茎环结构、假结结构等;RNA构象多变导致在普通琼脂糖凝胶电泳时,RNA的迁移速度不仅取决于分子量,还很大程度上取决于它折叠程度。

此外RNA对RNase很敏感,且RNase无处不在,使得RNA非常容易降解。

因此,RNA电泳通常要跑变性胶,先通过变性处理把RNA的二级结构打开,让迁移率只和分子量相关。

但有些情况,DNA Marker确实可以“凑合用”

主要看实验目的是什么,许多实验一般会使用DL2000的Marker(如Yeasen Cat#10501ES)100 bp ladder(Yeasen Cat#10507ES)等结合普通琼脂糖凝胶电泳检测RNA。

以下是比较常见的“凑合”场景:

  • 快速检测RNA完整性:比如提完RNA,想看看有没有降解。这时候不需要精确大小,只要能看到条带清晰、没有拖尾。不过这种情况下也可以不用点Marker;

 

图1:使用翌圣的RNA提取试剂(货号10606ES),从HeLa细胞、293T细胞、肝组织和肿瘤细胞中提取RNA。

将提取的RNA进行琼脂糖凝胶电泳,电泳图如下图所示。结果显示:28S与18S的比值约为2:1,条带完整清晰。

  

  • 粗略判断RNA大小范围:比如确定体外转录产物或纯化的RNA的预期大小,此时可以采用普通琼脂糖凝胶电泳粗略判断大小。在预期1000nt的mRNA,在胶上位置应该比DNA Marker的1 kb条带稍低一点(靠下),因为跑得快,通常位置可能在DNA Marker 500bp~800bp之间。

   

总结:如果要精确分子量测定,如RNA测序验证、核酶活性分析等,则绝对不可以使用DNA Marker。必须使用相应的RNA Marker或已知大小的转录本。此外变性电泳也不建议使用DNA Maker,误差会比较大。

 

翌圣琼脂糖凝胶电泳完整解决方案

产品定位

产品名称

产品货号

规格

琼脂糖

Agarose琼脂糖

10208ES60

100 g

核酸染料

YeaRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water)

10202ES76

500 μL

10202ES76

500 μL

DNA Marker

GoldBand DL2000 DNA Marker

10501ES60

100 T

GoldBand DL600 DNA Marker

10502ES60

100T

GoldBand DL5000 DNA Marker

10504ES60

100 T

GoldBand DL10,000 DNA Marker

10505ES60

100 T

GoldBand 100bp DNA Ladder

10507ES60

100 T

GoldBand 1 kb DNA Ladder

10510ES60

100 T

GoldBand Full-Scale DNA Ladder

10511ES80

1 ml

GoldBand DL15000 DNA Marker

10512ES60

100 T

GoldBand 50 bp DNA Ladder

10515ES60

100 T

GoldBand 100 bp plus DNA Ladder

10516ES60

100 T

GoldBand 200 bp DNA Ladder

10517ES60

100 T

GoldBand 500 bp DNA Ladder

10518ES60

100 T

 

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