Lysotracker溶酶体探针应用
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2026-05-22
背景介绍
LysoTracker Green和LysoTracker Red是一类弱碱性、亲脂性的活细胞溶酶体特异性荧光探针，能够快速透过细胞膜标记酸性溶酶体，主要用于活细胞溶酶体特异性染色，直接标记溶酶体，观察溶酶体的数量、分布、形态、大小；用于亚细胞共定位研究，与目标蛋白/药物共染，判断其是否进入溶酶体；用于区分溶酶体与其它细胞器，与线粒体、内质网、脂滴、自噬体染料联用，明确细胞器位置关系。广泛应用于肿瘤学、免疫学、神经科学与代谢疾病研究。
应用示例
文献一：
Biomimetic Hydrogel-Mediated Mechano-Immunometabolic Therapy for Inhibition of ccRCC Recurrence After Surgery. Adv Sci (Weinh). 2024;11 (30):e2308734. doi:10.1002/advs.202308734（IF=14.1，Q1）
通过使用LysoTracker Green（Cat#40738ES）来特异性标记细胞内的溶酶体，通过共定位成像用于验证纳米颗粒的溶酶体逃逸能力，评估纳米颗粒被细胞内吞后能否从溶酶体中逃逸进入细胞质。
文献通过使用肾癌细胞Renca，与 Cy3标记的CISE NPs共孵育不同时间（0、1、3、6 h）。50 nM LysoTracker Green染色1 h用于标记溶酶体，通过激光共聚焦显微镜CLSM (Zeiss LSM900) 观察荧光共定位。过红色（Cy3-siRNA）与绿色（LysoTracker）的重叠程度来判断溶酶体滞留还是逃逸，当共孵育3h时Cy3-siRNA的红色荧光与LysoTracker Green绿色荧光高度重叠，CISE NPs纳米颗粒被内吞后被困在溶酶体内部，当共孵育延长至6h时，Cy3-siRNA红色荧光从LysoTracker Green溶酶体区域扩散到整个细胞质，CISE NPs纳米颗粒在内体酸性环境刺激下发生解组装，负载的Cy3-siRNA成功从溶酶体逃逸到细胞质（如下图示）。
图1、细胞对CISE NPs纳米颗粒的摄取及溶酶体逃逸
文献二
Targeting Rab7-Rilp Mediated Microlipophagy Alleviates Lipid Toxicity in Diabetic Cardiomyopathy. Adv Sci (Weinh). 2024;11 (29):e2401676. doi:10.1002/advs.202401676（IF=14.1，Q1）
在糖尿病心肌病DbCM体外模型中，使用Lysotracker green（Cat#40738ES）探针对新生小鼠心肌细胞NMCMs进行染色用于实时示踪溶酶体，通过示踪脂滴LDs与溶酶体的共定位与直接融合，证实微脂噬microlipophagy的存在。
新生小鼠心肌细胞 NMCMs，通过高糖/棕榈酸（HGPA）构建DbCM体外模型，在活细胞状态下加入Lipi-Red（红色，用于标记脂滴）、LysoTracker Green（绿色，用于标记溶酶体）、Hoechst 33342（蓝色，用于标记细胞核），使用Zeiss LSM 880 激光共聚焦显微镜，37℃、5% CO2活细胞工作站进行拍摄，通过ImageJ/Fiji 计算Pearson's R共定位系数来反映脂滴与溶酶体结合程度。
结果表明：高糖/棕榈酸HGPA显著促进脂滴向溶酶体招募，与对照组相比HGPA组LDs与LysoTracker 信号共定位显著升高，DbCM状态下，脂滴被主动运输至溶酶体。该过程不依赖自噬体：通过用3-MA抑制巨自噬/自噬体形成后，LDs-LysoTracker共定位无明显下降，脂滴降解不依赖自噬体包裹，属于微脂噬。
图2、NMCMs中脂滴Lipi-Red和溶酶体Lysotracker共定位成像
文献三
Intra-Operative Definition of Glioma Infiltrative Margins by Visualizing Immunosuppressive Tumor-Associated Macrophages. Adv Sci (Weinh). 2023;10 (28):e2304020. doi:10.1002/advs.202304020（IF=14.1，Q1）
Lysotracker用于特异性标记活细胞溶酶体，CP2-M是靶向CD206的pH激活型近红外比率荧光探针，特异性标记M2型肿瘤相关巨噬细胞，通过共定位成像，验证探针CP2-M的细胞内吞与亚细胞定位。
对小鼠骨髓来源巨噬细胞BMDM进行诱导，诱导极化为M1、M2型巨噬细胞。使用CP2-M及LysoTracker和M1及M2型巨噬细胞共孵育，通过激光共聚焦显微镜成像，计算Pearson's R相关系数，反映共定位程度。CP2-M被巨噬细胞内吞后主要定位于溶酶体/吞噬体，在M2型巨噬细胞中定位更特异、更富集，为其响应酸性吞噬体pH提供了直接依据。
翌圣相关溶酶体探针产品
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产品名称 |
货号 |
Ex/Em（nm） |
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40738ES |
504/511 |
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40739ES |
577/590 |
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40767ES |
443/505 |
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40768ES |
329、384/ 440、540 |
