本试剂盒基于分光光度法原理，通过测定叶绿素提取液在特定波长(645 nm和663 nm)处的吸光度，计算植物样本中叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素含量，适用于各种植物叶片及其他含叶绿素的组织样本。

产品信息

备注：

提取液配置：将无水乙醇和丙酮按照1:2（v:v）比例充分混匀为提取液待用。

使用说明

1.仪器试剂准备

可见分光光度计、1 cm光径玻璃比色皿、10 mL离心管、研钵、天平、无水乙醇、丙酮和蒸馏水。

2.样本前处理

1）液氮研磨法

①取新鲜植物叶片（去掉中脉）或其他组织，蒸馏水清洗干净后用吸水纸吸干表面，加液氮避光条件下研磨成粉，用10 mL 离心管准确称取植物粉末约0.1 g；

②加入1 mL蒸馏水，称取约50 mg试剂一粉剂加入其中，混匀；

③用提取液定容至5 mL，混匀，避光反应3 h以上（直到叶片粉末全部变成白色为止）；

④4000转/分，离心10分钟，取上清液（用提取液）稀释到合适的浓度（OD值＜1），提取液调零，分别在645 nm和663 nm 处分光光度计读取吸光度值。

2）机械匀浆法

①取新鲜植物叶片（去掉中脉）或其他组织，蒸馏水清洗干净后用吸水纸吸干，称取约0.1 g剪碎，置于研钵；

②加入1 mL蒸馏水，少量试剂一50 mg，在避光条件下充分研磨后置于10 mL玻璃试管内；

③用提取液冲洗研钵，将洗液转移至玻璃试管，提取液定容至5 mL，在避光条件下浸提约3 h以上（直到叶片粉末全部变成白色为止）；

④4000转/分，离心10分钟，取上清液（用提取液）稀释到合适的浓度（OD值＜1），提取液调零，分别在645 nm和663 nm 处分光光度计读取吸光度值。

3.计算公式

叶绿素a含量（mg/g鲜重）=（12.7×A663 - 2.69×A645）× V提取液× N÷m÷1000

叶绿素b含量（mg/g鲜重）=（22.9×A645 - 4.68×A663）× V提取液× N÷m÷1000

叶绿素总含量（mg/g鲜重）=（20.21×A645 + 8.02×A663）× V提取液× N÷m÷1000

其中，V提取液：表示提取液总体积5 mL；N：表示比色前稀释倍数；m：表示样本质量（g）。

2～8℃保存，有效期3个月。