推荐应用
双碱性内切酶又称为Kex2蛋白酶、YSCF蛋白酶,在酵母体内Kex2蛋白酶负责加工killer toxin和α-factor的前体,是一种钙离子依赖型的丝氨酸蛋白酶,能特异性识别和切割Arg-Arg、Lys-Arg等双碱性氨基酸羧基端肽键。与胰蛋白酶不同,Kex2不能识别和切割单一碱性氨基酸即精氨酸或赖氨酸的羧基端肽键。Kex2蛋白酶活性不受常规的丝氨酸蛋白酶抑制剂如抑肽酶、PMSF、TPCK所抑制。
翌圣重组Kex2蛋白酶是由毕赤酵母表达,不含任何动物源成分,无动物源性的病毒污染,与天然的酿酒酵母Kex2酶具有相同的酶特异性。最适作用pH为pH9.0,稳定储存的pH为5.0-6.0。
翌圣此款重组Kex2蛋白酶以液体形式供货,浓度为 1 mg/mL,方便客户直接使用。另外,翌圣还提供冻干粉形式的重组Kex2蛋白酶(Cat#20418ES),可2~8度保存。
| 来源(Source) | 毕赤酵母重组表达 |
| 分子量(Molecular Weight) | 理论值67.0±6.7 kDa |
| 外观(Appearance) | 无菌液体 |
| 浓度(Concentration) | 1 mg/mL |
| 蛋白保存液(Storage Buffer) | 10 mM NaAc-HAc,50%甘油,pH5.2 |
| 比活(Specific activity) | ≥10.0 units/mg pro |
| 纯度(Purity) | ≥95% |
| 活性定义(Activity Definition) | 25℃,50 mM Tris-HCl,2 mM CaCl2,pH8.0的3 mL反应体系中,每分钟催化底物Boc-QRR-pNA释放出1 μmoL对硝基苯胺(4-nitroaniline)的酶量定义为一个酶活单位(Unit) |
使用说明(应用举例)
1. 反应体系:
| 融合蛋白 | 5 mg |
| Kex2酶 | 5-100 ug(推荐使用比例:蛋白酶:融合蛋白质量比1:50~1:1000) |
| 缓冲体系(50 mM Tris-HCl,2 mM CaCl2,pH8.0) | Up to 100 uL |
2. 反应条件:充分混匀,37℃反应10 min。
注:反应时,可用50 mM Tris-HCl,2 mM CaCl2,pH8.0作为反应稀释液;反应体积可根据作用底物的量进行放大。
-15~-25℃保存,有效期 1 年。
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