产品简介

 

磁珠法96孔样本前处理试剂盒FN（预封装）适用于生物制品样本的前处理，样本类型包含抗体药物和基因细胞治疗的病毒液等。本试剂盒采用独特磁珠和精心优化的缓冲体系，可最大限度从复杂样本基质中分离纯化生物制品中的微量DNA（如宿主细胞残留DNA、支原体DNA等），且主要搭配翌圣生物96通道自动化核酸提取仪(Cat#80510ES01)使用，实现核酸的高通量提取。

该前处理试剂盒可与本公司的多种宿主细胞残留DNA检测试剂盒配合使用，包括Vero残留DNA检测试剂盒（Cat#41307ES）、E.coli残留DNA检测试剂盒(Cat#41308ES)、HEK293残留DNA检测试剂盒(3G) (Cat#41331ES)、CHO残留DNA检测试剂盒(3G) (Cat#41332ES)、等。此外，该前处理试剂盒还可配套支原体qPCR检测试剂盒（探针法）(2G) (Cat#40619ES)使用。

 

组分信息

 

类别*	组分编号	组分名称	18468ES48	18468ES59
Part I	18468-A	样本处理板	1块	1块
	18468-B	漂洗板	1块	1块
	18468-C	洗涤板+磁珠	1块	1块
	18468-D	洗脱板	1块	1块
	18468-E	96深孔磁棒套	1块	1块
	18468-F	裂解液	6 mL	12 mL
Part II	18468-G	糖原	450 μL	900 μL
	18468-H	Poly A钾盐	300 μL	600 μL
Part III	18468-I	蛋白酶 K（20 mg/mL）	1 mL/支×1	1 mL/支×2

^*本试剂盒适用机型为翌圣生物96通道自动化核酸提取仪(Cat#80510ES01)及同类型仪器（加热板位为1、6）。

 

运输和储存条件

 

1. Part I组分室温运输，室温保存，有效期1年。

2. Part II组分干冰运输，-25~-15℃保存1年。

3. Part Ⅲ组分冰袋运输，4℃可保存1年。

4. 收到货后，请检查Part I、Part II和Part Ⅲ共3个组分中的试剂是否齐全，并立即放入对应的保存温度中储存。

 

注意事项

 

1. 本产品仅作科研用途。为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

2. 使用前请仔细阅读使用说明书，严格按照说明书操作，样本处理建议在超净台或生物安全柜中进行。

3. 注意观察室温保存溶液是否有析出或浑浊（尤其冬季室温为低温环境时），可37℃水浴至溶液澄清，避免影响使用效果。

4. 自动化核酸提取仪使用前与使用后，需使用75%酒精擦拭提取仪内部，并进行紫外消毒30 min。

5. 处理样本及加样时，勤换枪头，避免交叉污染。

6. 洗脱时可能存在磁珠残留，吸取样本时应尽量避免吸入磁珠。

 

使用说明

 

1. 实验前准备

1）自备设备：漩涡振荡器、水浴锅或金属浴、翌圣96通道自动化核酸提取仪或其他品牌自动化核酸提取仪。

2）自备耗材：10 μL~1000 μL不等的低吸附带滤芯枪头、1.5 mL低吸附离心管。

3）自备试剂：1×PBS缓冲液（pH 7.4，无Mg和Ca离子）、超纯水^*。

^*推荐您购买本公司的超纯水（Cat#10116ES）。

2. 实验方法

1）预封装试剂准备

a. 从试剂盒中取出预装板，颠倒混匀数次使磁珠重悬，轻甩孔板，使试剂及磁珠都集中到孔板底部。小心撕去预装板封膜，避免振动，防止液体溅出。

b. 根据处理样本数量，向预装板样品处理孔加入9 μL糖原和6 μL Poly A钾盐。

2）样本处理

a. 待测样本为疫苗等本身含有较高DNA含量的样本，可用1×PBS（pH7.4，无Mg和Ca离子）对样本进行适当比例稀释后提取（对样本进行稀释是为了保证检测的准确性，使样本的检测值在标曲线性范围内，通常可考虑进行100倍稀释）。

b. 待测样本为干粉时，可用超纯水将样本稀释成10 mg/mL或100 mg/mL后使用。

c. 待测样本为复杂背景基质时，可根据需要进行加标回收实验，以确定合适的样本稀释倍数。

d. 取100 μL样本置于1.5 mL离心管中，再加入100 μL裂解液和10 μL蛋白酶K^*，涡旋混匀10 sec。

^*样本蛋白浓度为0~100 mg/mL时，蛋白酶K用量为10 μL；样本蛋白浓度为100~200 mg/mL时，蛋白酶K用量为20 μL。

e. 60℃孵育20 min，即为预处理样本，待用。

3）自动化提取

a. 将预处理样本加入样品处理板。

b. 将96孔磁棒套正确放入核酸提取仪器的磁棒架中，并按如下顺序将各96孔板正确安放至核酸提取仪器中。

板位	板位1	板位2	板位3	板位6
试剂	样本处理板	漂洗板	洗涤板+磁珠	洗脱板

表1 翌圣96通道自动化提取仪中各96孔板安装位置说明

c. 运行如下程序，程序结束后，将洗脱液转移至新的离心管中，溶液可置于-25~-15℃短期保存（不超过3 个月），-80℃长期保存。

 

步骤		第1步（移磁珠）	第2步（结合）	第3步（清洗1）	第4步（清洗2）	第5步（洗脱）	第6步（弃磁珠）
板位		3	1	2	3	6	3
等待时间		0 min	0 min	0 min	0 min	4 min	0 min
混合模式	混合速度	200000	200000	300000	300000	200000	100000
	混合时间*	10 s	10 s	10 s	10 s	10 s	10 s
混合时间**		20 s	15 min	1 min	1 min	8 min	10 s
是否暂停		否	否	否	否	否	否
吸磁时间		60 s	90 s	60 s	60 s	90 s	0 s
体积		500μL	600μL	500μL	500μL	100μL	500μL
温度		/	/	/	/	65℃	/

表2 翌圣96通道自动化提取仪提取程序

^*此处的混合时间是混合模式设置中的混合时间。

^**此处的混合时间是程序编辑页面中的混合时间。

 

 

Ver.CN20240527