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19101ES回收率低,有什么建议吗？
19101ES回收率低,有什么建议吗？
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2026-08-24
1）电泳的时候，用新鲜的电泳液，不新鲜的会导致PH值升高，降低DNA和膜的吸附力;
2）切胶的时候在保证目的片段的情况下，尽可能的减少胶体积，并且减少紫外灯下的暴露时间;
3）观察加了溶胶液后混合物的颜色，如果是如溶液颜色为橙色或紫色，需要加入10μL3M醋酸钠（pH值5.2）溶液混合。混合物的颜色变成黄色后进行后续实验;
4）溶胶要完全，可适当延长水浴时间和上下颠倒的次数;
5）加洗脱液前，可适当延长室温晾干时间;
6）70℃预热洗脱液，可提高回收率，加洗脱液时注意加到膜中央，延长室温静置时间。
7) 回收小片段，可以多加溶胶液，溶胶后可以加入0.3 倍体积的异丙醇，可显著提高回收率；另外使用70℃预热的洗脱液也可以提高回收产量。
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