18730ES提取的 DNA 产量低,如何解决?
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2026-08-24
(1)样本采集与保存:
1.事先了解提取样本中 DNA 含量水平;
2.样本保存时要尽可能的避免反复冻融,保存时间不宜太久;
3.样本投入量适量,不宜过多或过少;
(2)样本前处理和裂解:
选择合适的前处理及裂解方式(比如延长裂解和沉淀DNA 的时间等),避免堵柱,并尽可能的将样本中的DNA 完全释放出来
(3)提取纯化:
1.使用沉淀法提取DNA 时,可以 1/10 体积的醋酸钠(pH5.2)有助于 DNA 沉淀;
2.在消化液中加入有乙醇后有沉淀析出时,用移液枪吸打几次打散沉淀有利于提高产量困难;
3.洗脱buffer 中无水乙醇添加量不准确,按照说明书正确添加无水乙醇;
4.添加洗脱液前过度干燥吸附柱:开盖时间不宜超过 5min,否则易造成 DNA 洗脱
5.洗脱液问题:请使用Elution Buffer 洗脱;若用 ddH2O 或其他洗脱液时,确认其
PH 值在 7.0-8.5 之间;
6.洗脱不充分:使用柱式试剂盒对 DNA 产物洗脱的时候,预热洗脱液并滴加在膜中央位置,尽可能的覆盖整个吸附膜,增加洗脱体积或者二次洗脱也可增加产量。
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