近年来，造成人类感染的病原微生物日益复杂，种类增多，抗菌药物滥用致使细菌耐药，病原微生物已成为全球关注的焦点。据WHO统计，在中国，感染性疾病占所有疾病的50%以上。面对重症感染患者，能否快速确认感染病原体，成为后续对症治疗的关键，基于宏基因组新一代测序技术（metagenomics next-generation sequencing, mNGS）为解决这一问题提供了一个可能的突破方向。

mNGS具有不依赖于传统的微生物培养，直接对临床样本中的核酸进行高通量测序，能够快速、客观的检测临床样本中的较多病原微生物的特点。

mNGS的检测流程可以大致分为5个步骤：核酸提取、文库构建、上机测序、生信分析与报告解读。

图1： mNGS检测流程图（Gu W et al. Annu Rev Pathol-Mech.2019.14(1), 319）

Yeasen为 mNGS湿实验部分（核酸提取，文库构建）提供完整解决方案：

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解决方案一：核酸提取系列

Yeasen MolPure®柱式核酸提取系列试剂盒采用MolPure® DNA/RNA Column和新型的溶液体系，适用于从各种反应体系样品、多种动植物样本、菌体等复杂样本中高效提取和纯化高纯度、高质量的核酸。可直接用于各种分子生物学实验。

产品特点

1）适用样本广：用于动物组织、血浆、血清、淋巴液、培养上清、分泌物、拭子、粪便、牛奶、尿液等样品；

2）合并提取：同时提取样本的DNA与RNA；

3）提取纯度高：采用硅基质材料的离心吸附柱，可提取纯度高的病毒RNA/DNA，质量稳定可靠；

4）满足多种下游应用：可适用于各种下游应用实验，如酶切、PCR、反转录和RT-PCR、NGS等。

产品性能

1. 分别验证小鼠组织、细菌和粪便中核酸提取的效率，结果显示Yeasen核酸提取效率高于竞品公司。

图2：小鼠组织（左）细菌和粪便（右）DNA提取琼脂糖胶图，A表示Yeasen试剂盒，F、T、O表示竞品公司

产品详情

产品类型	产品名称		货号
核酸提取	病毒DNA/RNA提取试剂盒	MolPure® Viral DNA/RNA Kit	19321ES
	组织DNA提取试剂盒	MolPure® Cell/Tissue DNA Kit	18700ES
	细菌DNA提取试剂盒	MolPure® Bacterial DNA Kit	18806ES
	粪便DNA提取试剂盒	MolPure® Stool DNA Kit	18820ES

解决方案二：DNA文库构建系列

Hieff NGS® OnePot II DNA Library Prep Kit酶切法DNA建库试剂盒，摆脱了繁琐的超声流程，操作简便化，片段化/末修加A可在一步操作中完成，针对不同样本(含FFPE)均可以获得高质量文库，尤其满足病原样本快速建库需求，亦是自动化平台建库的首选。

产品特点

1）实验流程更精简：片段化/末修/加A一步完成，大大缩减建库时间；

2）样本适用范围广：适用于痰液，腹水，脑脊液，FFPE等各类样本；

3）适用场景更广泛：自动化建库平台首选；

4）酶切可控时间长：仅需调整酶切时间即可得到目标片段；

5）耐抑制物能力强：对于复杂样本中的一些抑制物有更好的耐受能力。

性能展示

1. 不同模板的质量不均一，采用不同的酶切时间可获得优质文库。

产品详情

平台类型	方法	产品名称		货号
Illumina平台	DNA酶切法	酶切法建库试剂盒	Hieff NGS® OnePot II DNA Library Prep Kit for illumina	12204ES
Illumina平台	配套接头	单端接头	Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 1,2,3,4	12615ES - 12618ES
MGI平台	DNA酶切法	酶切法建库试剂盒	Hieff NGS® OnePot II DNA Library Prep Kit for MGI®	13321ES
	配套试剂	环化试剂盒	Hieff NGS® Fast-Pace DNA Cyclization Kit for MGI®	13341ES
	配套试剂	MGI接头	Hieff NGS® Complete Adapter Kit for MGI®, Set 1,2,3	13360ES - 13362ES

解决方案二：RNA文库构建系列

Hieff NGS® Dual-mode RNA Library Prep Kit是翌圣生物推出针对微量RNA构建试剂盒，可以衔接市面上mRNA纯化试剂盒或rRNA去除试剂盒构。本试剂盒提供的所有试剂都经过严格的质量控制和功能验证，保证了文库构建的稳定性和重复性。

产品特点

1）操作简便：二链合成，末修加A合并为一步，操作更加简便；

2）适用范围广：适用于pg级别的微量样本建库；

3）病原微生物检测：适用于不同来源的病原微生物检测（痰液，肺泡灌洗液，脑脊液等低浓度样本）；

4）产品稳定：不同生产批次间稳定。

性能展示

1.选取来源于不同人体的痰液和肺泡灌洗液提取的RNA样本，经rRNA去除之后进行RNA文库构建，表明低浓度样本亦可高效建库。

样本信息	痰液					肺泡灌洗液
RNA	A1	A2	A3	A4	A5	B1	B2	B3	B4	B5
扩增前浓度	0.576	0.392	0.366	0.826	0.554	0.612	0.504	0.316	0.396	0.482
文库2次纯化后浓度	10.8	8.26	9.32	8.64	10.8	6.70	7.3	8.9	6.0	5.08
产量(ng)	216	165.2	186.4	172.8	216	134	146	178	120	101.6
提取样本浓度较低，测不出来浓度，且经过rRAN去除

产品详情

平台类型	方法	产品名称	货号
Illumina平台	RNA建库法	Hieff NGS® Ultima Dual-Mode RNA Library Prep Kit for illumina®	12252ES
MGI平台	RNA建库法	Hieff NGS® Dual-Mode RNA Library Prep Kit for MGI®	13332ES

解决方案三：文库定量系列

dsDNA Assay Kit for Qubit®是Yeasen开发的专门用于Qubit®荧光仪或荧光酶标仪的试剂盒，线性范围0.2-100 ng，即使在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下，也可以选择性的检测dsDNA，且耐受较高浓度的蛋白质、盐类、洗涤剂等污染物。

产品特点

1）简便：实验操作与原装品牌一致，5min之内出结果；

2）灵敏：准确定量0.2-100ng样本；

3）准确：包含FFPE、cfDNA等样本在内的测试误差均小于10%；

4）稳定：严格批次间稳定性指控。

性能展示

1. 可准确定量dsDNA浓度在0.2-100ng的样本，且不论在低浓度区间（0-1ng）或高浓度区间都能准确定量。测量值与实际值误差：1%-10% ；与原装Life实际定量误差：1%-15%。

图3： dsDNA Assay Kit for Qubit®测试准确性。样品使用标准品，每个测试3个平行，CV≤5%。

产品详情

产品类型	产品名称		货号
文库定量	Qubit定量试剂盒	dsDNA HS Assay Kit for Qubit®	12640ES
	Qubit定量试剂盒	1×dsDNA HS Assay Kit for Qubit®	12642ES
	qPCR定量试剂盒	Hieff NGS® Library Quantification Kit for Illumina®, qPCR Master Mix	12302ES

解决方案四：文库纯化系列

Hieff NGS® DNA Selection Beads基于SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization)原理，配合精心优化过的缓冲体系，可用于二代测序文库构建过程中的DNA片段分选、纯化。操作方式与AMPure XP Beads相同，片段回收效率和文库大小分布亦与AMPure XP Beads高度吻合。

产品特点

1）操作简便：无缝替代XP，实验操作、文库大小和产量与XP完全一致；

2）纯化分选效果优异：纯化回收效率高达90%，精准分选；

3）适用多种样本：适用于FFPE、粪便、gDNA、微生物、血液等样本的纯化与分选；

4）通用性广：兼容各种品牌建库试剂盒；

5）品质稳定：不同生产批次间无差异。

性能展示

1. 相同的分选比例，Yeasen磁珠与XP磁珠分选效果相当。

图片.png
图4：磁珠分选精度与XP对比示意图

产品详情

产品类型	产品名称		货号
磁珠纯化	DNA磁珠	Hieff NGS® DNA Selection Beads 分选磁珠(完美替代AMPure XP Beads)	12601ES
磁珠纯化	RNA磁珠	Hieff NGS® RNA Cleaner	12602ES

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类别			名称	货号	规格
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	连接模块	Hieff NGS^® UltimaTM DNA Ligation Module		12604ES24/96	24/96 T
		Hieff NGS^® Fast-Pace DNA Ligation Module		12607ES24/96	24/96 T
	扩增模块	2×Super Canace^® II High-Fidelity Mix for Library Amplification		12621ES24/96	24/96 T
		2×Super Canace^®Ⅱ Uracil High-Fidelity Mix for Library Amplification		12620ES24/96	24/96 T
		2× Ultima HF Amplification Mix for MGI^®		13344ES24/96	24/96T
	环化模块	Hieff NGS® Fast-Pace DNA Cyclization Kit for MGI^® MGI^®		13341ES16/96	16/96 T
接头	完整接头	Hieff NGS^® Complete Adapter Kit for Illumina^®		12615/6/7/8ES04/16	12×4/12×16 T
		Hieff NGS^® Complete Adapter Kit for MGI^®		13360ES02/04/96	8×2/4/100 T
	短接头	Hieff NGS^® 96 Single Index Primer Kit for Illumina^®		12611/2ES02	48×2 T
		Hieff NGS^® 384 Dual Index Primer Kit for Illumina^®		12613/4ES02	96×2 T
磁珠	DNA分选	Hieff NGS^® DNA Selection Beads		12601ES56/75	60/450mL
定量	Qubit	dsDNA HS Assay Kit for Qubit^®		12640ES60/76	100/500 T