如何制备SDS聚丙烯酰胺凝胶
聚丙烯酰胺凝胶电泳简称PAGE(Polyacrylamde gel electrophoresis),是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用的电泳技术。聚丙烯酰胺由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成,聚合过程由自由基催化完成。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是在1967年被Shapiro建立,1969年由Weber和Osborn进一步完善,其作为一种蛋白表达分析重要技术。

图1. PAGE凝胶构造原理图
为了解决蛋白表达实验中目的蛋白的表达情况、目的蛋白的纯度以及观察蛋白样本中不同区域蛋白丰度情况等实验问题,可根据样本中蛋白质分子量的大小差异,实现不同蛋白在电泳胶中分离。
2、但价格昂贵,玻璃胶容易出现碎裂以及气泡现象,塑料胶经常出现胶板粘合度不够,分离现象!
翌圣生物自主研发的彩色PAGE凝胶快速制备试剂盒系列产品,包含了分离胶和浓缩胶预混溶液,只需加入改良型促凝剂过硫酸铵即可凝胶,简化了传统配胶的操作步骤和操作时间,避免了预制胶产品带来的不稳定性以及不确定性因素,摆脱了TEMED带来的污染以及恶臭味;同时提供了彩色上层浓缩胶染料,醒目发现与下层胶的分界线,以便随时更改电压电流,使点样孔清晰容变化,方便点样。
特色一:辨识度强,凝胶采用彩色上层胶,易于区分上下层胶,方便后续电压电流更改;

图2. 彩色PAGE凝胶示例图
特色二:快捷,相比传统凝胶配置,配胶步骤大大缩短,配胶时间仅5-10 min即可完成;
特色三:环保,凝胶无TEMED恶臭味,其中改良型过硫酸铵可被自然所降解;
特色四:稳定,凝胶均匀、不易碎、有弹性,蛋白条带条形美观;
特色五:价格优惠,单盒可完成125块0.75mm凝胶制备,每块仅需2.5元。
图4. 不同品牌PAGE凝胶制备试剂盒产品规格及价格
注:20351ES、20352ES为翌圣两款蛋白marker产品;marker上样量5ul;电泳时间:浓缩胶110V 10min,分离胶180V 40min;
FAQ:
Q:不同凝胶使用浓度如何?
A:以下推荐
胶浓度
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分离范围(kDa)
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最佳范围(kDa)
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6%胶
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70-300
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120-250
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8%胶
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50-250
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80-200
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10%胶
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20-100
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30-90
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12%胶
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15-60
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15-40
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15%胶
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8-40
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10-20
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