Phosbind是一种新型的磷酸盐结合标签和功能分子，在中性pH（生理pH）条件下可以特异性结合磷酸离子。Phosbind是一种双环金属络合物（1,3-bis[bis(pyridin-2-ylmethyl) amino]propan-2-olato dizinc(II) complex），是一种选择性的磷酸结合标签，在中性pH的水溶液中，其对苯基磷酸酯二价阴离子（PH-OPO₃^2-）的Kd值为25 nM (在Zn²⁺的情况下)。

Phosbind Acrylamide提供了一种特异性的电泳过程（锰 (II)- Phosbind SDS-PAGE），可同时对磷酸化蛋白及其对应的非磷酸化形式进行分析。

此产品最适合做的蛋白大小在30 kDa-130 kDa之间。

 

产品信息

货号	20335ES08/20335ES10
规格	5 mg/10 mg

 

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号		储存条件
		20335ES08	20335ES10
20355ES-A	Phosbind溶液	5 mg（5mmol/L）	10 mg（5mmol/L）	2~8℃保存
20355ES-B	MnCl2	100 mg	100 mg	2~8℃保存

 

储存条件

2~8℃保存，有效期1年。

 

产品特点

1.可识别Ser / Thr / Tyr 的所有磷酸化形式。

2. 可适用于免疫印迹和质谱分析等后续操作。

3. 可用总抗体而非抗磷酸化蛋白的抗体即可同时检测磷酸化和非磷酸化的蛋白。

4. 在制备SDS-PAGE凝胶时只需在丙烯酰胺溶液中简单加入Phosbind Acrylamide和MnCl₂溶液即可。

(1) 染色

• 适于激酶实验。

• 与常规SDS-PAGE几乎相同的机制。

(2) Western Blotting

• 不需要准备针对磷酸化蛋白的抗体。

• 可用于内源性蛋白的磷酸化分析。

• 不需要放射性同位素标记。

 

注意事项

1. Mn²⁺ - Phosbind SDS-PAGE使用Tris-Gly缓冲液体系，Zn²⁺ - Phosbind SDS-PAGE使用Bis-Tris中性缓冲液体系。
2. 免疫印迹转膜前，需使用EDTA去除凝胶中的金属离子，提高转膜效率。
3. 对于不同的蛋白，Phosbind使用的最优浓度并不一致，具体使用量请根据预实验结果进行优化，更多实验条件优化方案请参考
4. Phosbind实验指导手册。
5. Phosbind SDS-PAGE实验中，蛋白Marker不再作为蛋白分子量判断标准，可以用作转膜效率的参考基准。
6. Phosbind SDS-PAGE容易受到样品中的无机盐、表面活性剂、EDTA和钒酸等影响，造成条带弯曲或拖尾现象干扰实验结果，可以通过TCA沉淀或透析脱盐等处理样品以获得更好的实验结果。
7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
8. 本产品仅作科研用途。

 

 

 

Ver.CN20240718