让RNA建库，像RT-PCR实验一样操作简单

时代在发展，科学在进步。高通量测序技术已经走进越来越多的课题组，RNA-seq也不再高冷而神秘，已经作为常规的基础实验出现在各大期刊内。但是，是否仍然有人看到RNA-seq就头大、就畏惧，就觉得特别难呢？

预混版RNA建库试剂盒，解决了您的实验问题。试剂组分通过提前预混，精简组分，操作时，再也不用担心试剂漏加；样本多时，再也不用担心预配置试剂少了；实验上，再也不用担心加错组分了！

图：预混版与非预混版的试剂差异

让RNA建库，像RT-PCR实验一样简单，是怎么做到的呢？我们来看看操作步骤：

操作步骤	RNA建库	RT-PCR
RNA提取	有	有
gDNA去除	无	额外加三种试剂（ddH2O、gDNA digester buffer、gDNA digester），PCR一次
RNA片段化	额外加一种试剂（Frag/Prime Buffer），PCR一次	无
逆转录	额外加一种试剂（1st Reaction Module），PCR一次	额外加四种试剂（ddH2O、逆转录酶、逆转录buffer、逆转录引物），PCR一次
二链合成	额外加一种试剂（2nd Reaction Module），PCR一次	无
接头连接	额外加一种试剂（Ligation Reaction Module），PCR一次	无
PCR扩增	额外加两种试剂（扩增酶、接头引物），PCR一次	额外加四种试剂（ddH2O、扩增酶、扩增引物、定量后模板），PCR一次
纯化	磁珠纯化	切胶回收
测序	二代测序	一代测序
后续步骤	无	载体构建等

从上面步骤，可以看到，预混版试剂，实验操作不再复杂，加一次试剂，PCR一次，共加5次试剂（每次只加一个组分），PCR程序设置5次，即能获得文库。减少失误，减少失败率，RNA建库就是如此easy。

实验操作简单化，原理不太懂？没关系，实验原理，实验操作，B站关注翌圣生物，各种实验操作、技术原理，一应俱全（翌圣生物的个人空间_哔哩哔哩_bilibili）。

适用样本？不限制，物种全适用，不挑样本，RNA提取后，根据提取的质量好坏，技术类型，选择mRNA建库还是lncRNA建库方式，预混版RNA建库都能兼容。

不相信？来，上数据。

1.不同物种mRNA建库

图：不同物种mRNA建库，文库主峰都集中在500 bp左右

2.自动化建库和手动建库都兼容

图：Illumina平台自动化和手动建库结果对比，文库一致，产量相当

图：MGI平台自动化和手动建库结果对比，文库一致，产量相当

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