探寻肠道微生态：肠道致病微生物检测IVD解决方案 —精准识别与定量肠道有害菌

肠道菌群种类繁多、数量庞大，如何在海量微生物中精准识别并定量某一类有害菌，是检测的核心难题。qPCR 技术的答案，就藏在微生物的"基因身份证"里。每一种细菌，其基因组上都存在独一无二的特异性核酸序列，相当于该菌种的专属"基因条形码"。以致病性大肠杆菌为例，其毒力基因（如stx1、stx2、eaeA）、艰难梭菌的毒素基因（tcdA、tcdB）、沙门氏菌的invA基因等，都是高度保守、物种特异的分子标志物。检测人员正是针对这些毒力基因、管家基因或16S rRNA的菌种特异区段，设计专属引物与荧光探针，实现对目标有害菌的精准靶向识别。

qPCR 通过在反应体系中加入荧光染料或特异性荧光探针，实时监测每个循环的荧光信号变化，以 Ct 值（达到荧光阈值的循环数）反推样本中目标基因的初始拷贝数，实现定性与定量一步完成。

肠道感染往往并非单一菌种所致。多重qPCR在同一反应体系中加入多对引物与不同荧光标记的探针，可单管同步检测多种目标菌，大幅提升检测通量、缩短检测时间、节省样本与试剂。其核心难点在于引物探针间的相互干扰与荧光信号串扰，需精心优化引物设计、退火温度与缓冲体系。

在基层医疗、健康管理、食品安全快检等场景，环介导等温扩增（LAMP）、重组酶聚合酶扩增（RPA）等恒温扩增技术无需精密温度循环，在恒温条件下即可快速完成核酸扩增，肉眼或试纸条即可判读结果，为肠道有害菌的现场快速初筛提供了便捷补充。同时试剂可冻干，是便携式POCT与资源受限现场的优选。

粪便、直肠/肛拭子、肠液

粪便样本取含黏液 / 脓血部分约 100–200 mg，拭子样本可采用 1 mL 生理盐水或核酸保存液洗脱；加入裂解液涡旋混匀后，采用磁珠法 / 柱式法进行核酸提取，高效去除胆盐、多糖、血红素等 PCR 抑制物，提取的核酸直接用于下游扩增。若为现场快检，可经 95℃加热 5–10 分钟简易裂解后直接进等温扩增，无需复杂纯化；该简易裂解产物不建议直接用于 qPCR 检测。

18820ES（柱式粪便 DNA 提取试剂盒）、18527ES（磁珠粪便 DNA 提取试剂盒）

专门针对粪便基质优化核酸提取方案，有效降低内源抑制物对 PCR 扩增的干扰，提升低载量致病菌检出能力，减少假阴性；批次间扩增性能稳定，适合大批量队列样本检测。

依托高扩增效率的 qPCR 预混体系，支持多通道多重扩增，单管可同时检测多种肠道致病菌/毒力基因，大幅压缩样本检测周期，相比传统培养法显著提升检测通量。

核酸提取磁珠、qPCR预混液等核心组分全部自研自产，兼容自动化核酸提取，减少人工操作误差，助力高通量样本筛查项目落地。

方案面向高校科研团队开展肠道病原流行病学、菌群失衡相关研究；同时为IVD企业提供上游分子酶原料与体系参考方案，提供引物探针适配建议、扩增体系优化等技术支持，加速试剂开发项目推进。