推荐应用
重组型TEV蛋白酶(rTEV)是经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶,不仅保持天然TEV酶的功能活性,且在广谱的温度范围内表现出更强的稳定性和特异性。rTEV是一种用来切除融合蛋白上亲和标签的常用工具酶,具有很强的位点特异性,严格识别七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S),切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸/丝氨酸之间。普遍应用的七氨基酸序列为:Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH7.0,30℃时可达到最佳活性,但在pH6.0-8.5和温度4-30℃的广泛范围内皆有活性(见表1),使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而灵活变动。另外rTEV切割后也能利用其N端的6×His标签,通过Ni-NTA树脂去除,以达到纯化目的蛋白的目的。
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表1. 不同温度下rTEV酶切活性
| 反应时间(h) | 不同温度下剪切活性(%) | |||
| 4℃ | 16℃ | 21℃ | 30℃ | |
| 1 | 34 | 58 | 56 | 70 |
| 2 | 58 | 80 | 78 | 90 |
| 3 | 71 | 99 | 99 | 99 |
| 3.5 | 84 | 99 | 99 | 99 |
产品信息
| 编号 | 组分名称 | 产品货号/规格 | |||
| 20403ES80/1000U | 20403ES92/10×1000U | 20403ES10/10KU | 20403ES50/50KU | ||
| 20403-A | rTEV Protease(5 U/μL) | 200 μL | 10×200 μL | 2×1 mL | 10 mL |
| 20403-B | rTEV Buffer (10×) | 600 μL | 10×600 μL | 6 mL | 30 mL |
| 来源(Source) | 大肠杆菌 |
| 外观(Appearance) | 无色透明液体 |
| 比活力(Specific Activity) | 5 U/μL |
| 活性定义(Unit Definition) | 在1×rTEV Buffer(50 mM Tris,pH 8.0,0.5 mM EDTA,1 mM DTT)中,30℃反应1 h,剪切>85%的3 μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。 |
| 纯化(Purification) | Ni柱亲和纯化 |
| 纯度(Purity) | ≥95%(by SDS-PAGE) |
冰袋运输。rTEV Buffer于-20℃保存,一年稳定。rTEV Protease,-20℃保存,6个月稳定;-80℃长期保存,一年稳定。
建议收到货或者第一次使用时分装各组分保存,避免反复冻融。
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