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发光法支原体检测试剂盒(ATP酶法)是一款基于化学发光检测原理,用于判定细胞培养物及相关生物样本中是否存在支原体污染的检测试剂盒。本产品适用于低灵敏度检测仪器(例如Molecular Devices的SpectraMax M3等),可用于快速、可靠地评估细胞培养体系的支原体污染情况。
支原体(Mycoplasma)是一类无细胞壁的小型原核生物,不受青霉素等β-内酰胺类抗生素影响,部分种类可穿过 0.22 μm 滤膜,因此难以通过常规方法清除。由于代谢能力有限,支原体常依附于细胞表面,并在细胞培养中形成隐匿污染。支原体污染可改变细胞的基因表达和代谢状态,导致生长异常,从而影响实验结果的可靠性和重现性。因此,对细胞体系进行支原体监测十分必要。
细胞培养中若发生细菌、酵母或霉菌污染通常可在光学显微镜下观察到,但支原体因体积小且无细胞壁,一般无法直接识别,需采用专门检测方法。常用检测手段包括支原体培养、ELISA、生化法、PCR 以及 DNA 荧光染色等。但这些方法通常步骤繁琐、检测灵敏度有限或耗时较长。本试剂盒基于支原体特有酶活性,通过 ATP 依赖的荧光素酶发光反应检测样品中是否存在支原体污染。检测流程简便,仅需约 15 分钟,分为两个步骤:第一步:向样品中加入试剂 A,孵育 5 分钟后读取发光值 A,用于反映样品本底 ATP 水平。第二步:加入试剂 B 并孵育 10 分钟后读取发光值 B。若样品含有支原体,其特有酶可在试剂 B 专有底物的作用下将ADP 转化为 ATP,从而使读值 B 上升。通过计算 B/A 的比值即可判断污染情况:比值 > 1.2 表示样品存在支原体污染;比值 < 0.9 为阴性;0.9–1.2 为可疑区间,建议继续培养 24–48 小时后复测。
- 独特酶活检测:基于支原体特有酶活性,通过ATP依赖的萤光素酶发光反应进行检测,特异性识别活的支原体。
- 高灵敏度:性能验证显示,检测灵敏度优于竞品(可检出稀释16倍的阳性样本)。
- 覆盖种类广:可检测包括《中国药典》要求的口腔支原体、肺炎支原体等在内的44种支原体-。
- 快速简便:整个检测流程仅需约15分钟,操作简单,无需冗长的培养或复杂的核酸提取。
- 结果客观:通过计算B/A比值(>1.2为阳性,<0.9为阴性)判定结果,清晰客观-。
- 样本灵活:可直接使用细胞培养上清液检测,也适用于培养基、血清等样本。
- 仪器兼容性好:专为低灵敏度化学发光仪(如SpectraMax M3)设计-。
- 稳定性强:试剂在4℃可稳定保存30天,反复冻融10次仍保持稳定。
- 品质保障:生产符合ISO13485质量体系标准,可配合客户审计
1. 所有组分均干冰运输,-25~-15℃保存,有效期1年。其中,A组分需避光保存。
2. 收到货后,请检查共4个组分是否齐全,并立即放入对应的保存温度中储存。
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