GMyc-PCR Mycoplasma Detection Kit (2G) 支原体PCR检测试剂盒(巢式PCR)(2G)
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支原体PCR检测试剂盒(巢式PCR)(2G)是基于巢式PCR法(NestedPCR)对各种生物材料(如细胞培养物、实验动物分泌物和动物血清等)支原体感染的检测。该试剂盒采用定量PCR技术,针对支原体16S-23S rRNA序列保守区域设计两套引物,进行两轮PCR扩增,以第二轮扩增产物为准进行支原体污染情况判断。其可检出包括口腔支原体(M.orale)、肺炎支原体(M.pneumoniae)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)、精氨酸支原体(M.arginini)、鸡败血支原体(M.gallisepticum)、关节液支原体(M.synoviae)、发酵支原体(M.fermentans)、柠檬螺原体(Spiroplasma citri)、唾液支原体(M.salivarium)等在内的共34种支原体,灵敏度可达2.5 copies/uL,对于10 CFU/mL支原体标准菌株也可正常扩增有条带,具备特异性强、灵敏度高、操作方便快速等特点,可直接用于细胞培养上清液的检测。

本产品相较于常规PCR法支原体检测试剂盒,可避免由于引物与模板之间的非特异配对,导致非特异性产物的产生;还可灵敏的检测到样本中微量的支原体DNA,避免假阴性的产生。

产品特色

检测种类多:优化的巢式PCR技术可检测多达34种支原体;

• 专属性强:针对16S-23S rRNA设计引物探针,不与梭菌、乳杆菌等亲缘物种交叉反应;

• 灵敏度高:检测限可低至2.5 copies/μL;

• 操作简便:样本制备和检测总时长可短至2h以内;

• 安全性高:试剂盒内阳性对照(PC)无感染性,完全消除污染风险。

应用案例

检测限

1、本试剂盒第一轮PCR扩增产物灵敏度为1x103 copies/μL:

2、本试剂盒第二轮PCR扩增产物灵敏度为2.5 copies/μL:

专属性

1、检测范围:本2G版本巢式PCR支原体检测试剂盒检测了中外药典要求的10CFU/mL灵敏度的共8种支原体,均可检出。

PS:药典要求的支原体灭活菌株DNA模板浓度为10CFU/mL,鸡败血支原体、莱氏无胆甾原体由于样本不足未检测


组号
样本名称(英文)
中文名称是否检出
1Mycoplasma fermentans
发酵支原体

2Mycoplasma citri
柠檬螺原体

3Mycoplasma hyorhinis
猪鼻支原体

4Mycoplasma pneumoniae
肺炎支原体

5Mycoplasma orale
口腔支原体

6Mycoplasma synoviae
关节液支原体

7Mycoplasma arginini
精氨酸支原体

8Mycoplasma salivarium
唾液支原体

9PC
阳性对照

10NTC
阴性对照
×

2、样本基质干扰:选取了14种常见样品基质和试剂盒中的阳性对照及其加标(2.5copies/μL阳性对照)、阴性对照(PCR Mix)做验证,14种基质均未检出支原体。

加样顺序样本名称加样顺序样本名称
1MEM(1×)9RPMI medium
2MCDB 13110L-15 LEIBOVITZ MEDIA
3F-1211NUTRIENT MIXTURE-F-12 HAM'S
4IMDM12RPMI Medium Modified
5BME13Medium 199/EBSS
6McCoy's 5A medium14DMEM/LOW GLUCOSE
7DMEM15阳性对照
8opti-MEM16NTC


存储条件

干冰运输,-25~-15℃保存,有效期1年。

*整个试剂盒若较长时间不用,请避光保存。其中40614-C长期不用时,可-85~-65℃冷冻保存。

FAQ

Q:该试剂盒和40601基础款GMyc-PCR支原体检测试剂盒的区别是什么?

A:相比基础款GMyc-PCR支原体检测试剂盒,该升级款试剂盒的特异性更强、灵敏度更高、检测到的支原体种类更多,对比信息如下图示。

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