经TLCK处理的Chymotrypsin是一种丝氨酸蛋白酶（serine protease）,其功能是在芳香族氨基酸的羧基侧切割蛋白质链,该处理旨在灭活残留的胰蛋白酶活性。

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【仅供参考，具体实验请根据实际情况进行调整】

1. 工作液制备：

产品用1 mM HCl 配制成10 mg/mL溶液，可加入1~10 mM CaCl₂（如2 mM）（Cat# 706203ES）作为稳定剂。

【注】上述制备好的溶液可于2~8℃，保存一周左右。

2. 蛋白质酶解制备：

2.1 缓冲体系配置：100 mM Tris-HCl, 10 mM CaCl₂ (pH 7.8~8.0)， 将蛋白质溶解在缓冲体系中，难以溶解或需要变性才能有效消化的蛋白质可在25~37℃下用最小体积溶解在变性剂中（如8 M尿素或6 M盐酸胍），作用1 h；部分蛋白质，可能将样品加热（~60℃，15-20 min）会更有利于溶解变性；

2.2 向溶解的蛋白质中添加一定量的DTT（Cat# 20311ES）或β-Mercaptoethanol（如终浓度：5 mM），50~60℃，加热20 min；

2.3 上述还原后的蛋白质混合物冷却至室温，添加一定量的碘乙酰胺（Cat# 52598ES)（如终浓度：15 mM）；

2.4 用2.1中的缓冲液调节反应体系，使变性剂浓度不高于 1 M。

3. 酶重构：将凝乳蛋白酶溶解在 1 mM HCl 中，推荐终浓度为0.5-1 μg/μL。

4. 消化：添加凝乳蛋白酶至最终蛋白酶与蛋白比例为 1：200 至 1：20 (w/w)，25℃，孵育2~18 h。最后可加入0.5%TFA来终止消化反应。

粉末-25~-15℃保存，有效期2年。