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Aldehyde Fluorimetric Detection Assay Kit(Blue Fluorescence) 醛类荧光检测试剂盒(蓝色荧光)
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60540ES70
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快速检测醛类是生物学研究、食品工业和环境污染监督的重要任务,目前有许多试剂和试剂盒都可以用来定量分析总醛含量,但现存的醛类检测法大都基于分离法,如HPLC-MS或GC-MS,这几种方案操作繁杂且成本较贵,不适合高通量和经济型的检测要求。

翌圣生物提供的Aldehyde Fluorimetric Detection Assay Kit(Blue Fluorescence)醛类荧光检测试剂盒(蓝色荧光)采用了一种特殊的染料,该染料与醛反应后可形成荧光产物,检测非常灵敏,可检测100 µL测定体积中低至0.1 nM的醛(1 µM)。本试剂盒可以用于96或384微孔板分析,并易于适应自动化,无需分离步骤,荧光酶标仪可以很容易地在Ex/Em=365/435 nm处读取其信号,建议使用纯黑色的孔板。

产品特色

组分信息

组分编号组分名称规格储存条件
60540-AAldeLight Blue1 vial-25~-15℃避光保存
60540-BAssay Buffer1 bottle(30 mL)-25~-15℃保存
60540-CReaction Buffer6 mL-25~-15℃避光保存
60540-DAldehyde Standard1 vial-25~-15℃避光保存
60540-EDMSO100 µL-25~-15℃保存

注意事项

1. 该探针会与硫醇发生反应,如果样品含有硫醇,请用2-5 mM H2O2处理样品(包括对照)30分钟后,再进行测定。

2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4. 本产品仅作科研用途!


应用案例

使用说明

1.溶液制备

1.1储备溶液

建议将未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-25~-15℃的条件下,避免反复冻融循环。

1)AldeLight Blue 原液(250X):

将40 μL DMSO(组分E)加入AldeLight Blue(组分A)小瓶中,制成250X AldeLight Blue 原液。

2)醛类标准溶液(10 mM):

将1 mL ddH2O加入到小瓶标准品(组分D)中制备10 mM醛类标准溶液。

1.2.标准溶液(醛类标准溶液)

取10 mM 醛类标准溶液,在ddH2O中按1:10稀释,得到1000 μM醛类标准溶液(AS7)。然后按1:2比例依次稀释以获得其他浓度的醛类标准品(AS6-AS1)。【浓度信息为:AS6:333.3333 μM;AS5:111.1111 μM;AS4:37.0370 μM;AS3:12.3457 μM;AS2:4.1152 μM;AS1:1.3717 μM】。

1.3工作溶液

将20 μL 250X AldeLight Blue原液添加到5 mL测定缓冲液(组分B)中,并充分混合以制备AldeLight Blue工作溶液。【注:对于一个板,5 mL AldeLight Blue工作溶液已足够,且反应混合物不稳定,最好在2小时内使用。】

2.样品分析

2.1根据表1和表2中提供的布局加入醛类标准品(AS),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 μL试剂代替50 μL。【注意:该探针会与硫醇发生反应,如果样品含有硫醇,请用2-5 mM H2O2处理样品(包括对照)30分钟后,再进行测定。】

2.2在醛类标准品,空白对照品和测试样品的每个孔中加入50 μL AldeLight Blue 工作溶液,使总醛测定体积为100 μL/孔。对于384孔板,在每个孔中加入25 μL AldeLight Blue 工作溶液,总体积为50 μL/孔。

2.3将反应混合物在室温下孵育30分钟或更长时间,避光。

2.4每孔加入25 μL反应缓冲液(组分C)。

2.5荧光酶标仪下测量荧光数值,Ex/Em=365/435 nm。

表1 实心黑色96孔微孔板中的醛类标准品和测试样品的布局[AS=醛类标准品(AS1 - AS7,1至1000 μM); BL=空白对照;TS=测试样品]


BLBLTSTS
AS1AS1......
AS2AS2......
AS3AS3
AS4AS4
AS5AS5
AS6AS6
AS7AS7

表2 每个孔的试剂组成


容积试剂
AS1-AS750 μL连续稀释液(1至1000 μM)
BL50 μLddH2O
TS50 μL测试样品

3.实验方案概述

3.1在开始实验之前,将所有试剂盒组件解冻至室温。

3.2制备醛类标准品和/或测试样品(50 μL)。

3.3加入AldeLight Blue工作溶液(50 μL)。

3.4在室温下避光孵育至少30分钟。

3.5加入25 μL反应缓冲液(组分C)。

3.6监测Ex/Em=365/435 nm处的荧光增加。

存储条件

-25~-15℃避光保存,有效期12个月。

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