产品简介

 

快速检测醛类是生物学研究、食品工业和环境污染监督的重要任务，目前有许多试剂和试剂盒都可以用来定量分析总醛含量，但现存的醛类检测法大都基于分离法，如HPLC-MS或GC-MS，这几种方案操作繁杂且成本较贵，不适合高通量和经济型的检测要求。

翌圣生物提供的Aldehyde Fluorimetric Detection Assay Kit（Blue Fluorescence）醛类荧光检测试剂盒(蓝色荧光)采用了一种特殊的染料，该染料与醛反应后可形成荧光产物，检测非常灵敏，可检测100 µL测定体积中低至0.1 nM的醛(1 µM)。本试剂盒可以用于96或384微孔板分析，并易于适应自动化，无需分离步骤，荧光酶标仪可以很容易地在Ex/Em=365/435 nm处读取其信号，建议使用纯黑色的孔板。

 

组分信息

 

组分编号	组分名称	规格	储存条件
60540-A	AldeLight Blue	1 vial	-25~-15℃避光保存
60540-B	Assay Buffer	1 bottle(30 mL)	-25~-15℃保存
60540-C	Reaction Buffer	6 mL	-25~-15℃避光保存
60540-D	Aldehyde Standard	1 vial	-25~-15℃避光保存
60540-E	DMSO	100 µL	-25~-15℃保存

 

储存条件

 

-25~-15℃避光保存，有效期12个月。

 

 

使用说明

1.溶液制备 

1.1储备溶液

建议将未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-25~-15℃的条件下，避免反复冻融循环。

1）AldeLight Blue 原液（250X）：

将40 μL DMSO（组分E）加入AldeLight Blue（组分A）小瓶中，制成250X AldeLight Blue 原液。

2）醛类标准溶液（10 mM）：

将1 mL ddH₂O加入到小瓶标准品（组分D）中制备10 mM醛类标准溶液。

1.2.标准溶液(醛类标准溶液)

取10 mM 醛类标准溶液，在ddH₂O中按1:10稀释，得到1000 μM醛类标准溶液（AS7）。然后按1：2比例依次稀释以获得其他浓度的醛类标准品（AS6-AS1）。【浓度信息为：AS6：333.3333 μM；AS5：111.1111 μM；AS4：37.0370 μM；AS3：12.3457 μM；AS2：4.1152 μM；AS1：1.3717 μM】。

1.3工作溶液

将20 μL 250X AldeLight Blue原液添加到5 mL测定缓冲液（组分B）中，并充分混合以制备AldeLight Blue工作溶液。【注：对于一个板，5 mL AldeLight Blue工作溶液已足够，且反应混合物不稳定，最好在2小时内使用。】

2.样品分析

2.1根据表1和表2中提供的布局加入醛类标准品（AS），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 μL试剂代替50 μL。【注意：该探针会与硫醇发生反应，如果样品含有硫醇，请用2-5 mM H₂O₂处理样品（包括对照）30分钟后，再进行测定。】

2.2在醛类标准品，空白对照品和测试样品的每个孔中加入50 μL AldeLight Blue 工作溶液，使总醛测定体积为100 μL/孔。对于384孔板，在每个孔中加入25 μL AldeLight Blue 工作溶液，总体积为50 μL/孔。

2.3将反应混合物在室温下孵育30分钟或更长时间，避光。

2.4每孔加入25 μL反应缓冲液（组分C）。

2.5荧光酶标仪下测量荧光数值，Ex/Em=365/435 nm。

表1 实心黑色96孔微孔板中的醛类标准品和测试样品的布局[AS=醛类标准品（AS1 - AS7,1至1000 μM）; BL=空白对照；TS=测试样品]

BL	BL	TS	TS
AS1	AS1	...	...
AS2	AS2	...	...
AS3	AS3
AS4	AS4
AS5	AS5
AS6	AS6
AS7	AS7

表2 每个孔的试剂组成

孔	容积	试剂
AS1-AS7	50 μL	连续稀释液（1至1000 μM）
BL	50 μL	ddH2O
TS	50 μL	测试样品

3.实验方案概述

3.1在开始实验之前，将所有试剂盒组件解冻至室温。

3.2制备醛类标准品和/或测试样品（50 μL）。

3.3加入AldeLight Blue工作溶液（50 μL）。

3.4在室温下避光孵育至少30分钟。

3.5加入25 μL反应缓冲液（组分C）。

3.6监测Ex/Em=365/435 nm处的荧光增加。

4.注意事项

1. 该探针会与硫醇发生反应，如果样品含有硫醇，请用2-5 mM H₂O₂处理样品（包括对照）30分钟后，再进行测定。
2. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
4. 本产品仅作科研用途！

 

 

Ver.CN20240726