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400-6111-883
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400-6111-883
Hieff Canace® II High-Fidelity DNA Polymerase
产品货号:10140ES60
产品规格:100 U
产品价格:¥653
类别:建库模块与单酶原料

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  • 产品信息

    产品名称

    产品编号

    规格

    价格(元)

    Hieff Canace®Ⅱ High-Fidelity DNA Polymerase

    10140ES60

    100 U

    653.00

    Hieff Canace®Ⅱ High-Fidelity DNA Polymerase

    10140ES76

    500 U

    2453.00


    产品描述

       Hieff Canace® II High-Fidelity DNA Polymerase是新一代的高保真DNA聚合酶。该酶基于Pyrococcus Furiosis DNA Polymerase,经基因工程改造而成。其蛋白结构包含5’→3’聚合酶结构域和经过改造的3’→5’外切酶结构域。这种组合大幅度提升了酶的耐热性,保真性。耐热温度达到98℃,保真性是Taq DNA聚合酶的52倍,普通Pfu DNA聚合酶的6倍。该酶主要为NGS文库扩增所设计,克服了扩增不同GC含量模板带来的GC-bias,同时扩增效率比第一代的Canace高1.5倍,文库扩增产量大幅增加。本产品配备单独的buffer,并增加了特殊的扩增促进剂,具有极高的扩增效率和广泛的模板适应性。此产品与我公司文库扩增模块2×Super Canace® II High-Fidelity Mix for Library Amplification (Cat#12621)所用酶原料一致。


    产品组分

    编号

    组分

    规格

    10140ES60(100 U)

    10140ES76(500 U)

    10140-A

    Hieff Canace® II High-Fidelity DNA Polymerase(1 U/μL)

    100 μL

    500 μL

    10140-B

    2×Canace® II PCR buffer (含Mg2+,dNTPs)

    1 mL×3

    1 mL×15


    产品应用

    基因克隆;复杂DNA模板扩增;高通量建库。


    活性定义

    用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,74℃,30 min内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。

    质量控制

    核酸外切酶残留检测:20 μL反应体系,10 U本品和1 μg λDNA –Hind III,37℃下孵育4 h,DNA的电泳谱带无变化。

    核酸内切酶残留检测:20 μL反应体系,10 U本品和1 μg λDNA,37℃温育4 h,DNA的电泳谱带无变化。

    大肠杆菌残留DNA检测:50 μL体系中,加入2 U本品,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA 基因。30个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。


    运输与保存方法

    冰袋运输。

    -20℃保存,有效期2年。


    注意事项

    为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。


    使用方法

    在使用前,请务必仔细阅读使用说明。

    1、PCR反应体系(推荐冰上配制)

    表1 PCR扩增反应体系

    组分

    体积

    ddH2O

    to 50 μL

    2×Canace®Ⅱ PCR buffer (含Mg2+,dNTPs)

    25 μL

    模板或接头连接产物

    X

    NGS Primer 1 (10-25 μM)

    X μL

    NGS Primer 2 (10~25 μM)

    X μL

    Hieff Canace®Ⅱ High-Fidelity DNA Polymerase (1 U/μL)

    1 μL

    【注】:1)试剂使用:使用前要充分解冻混匀;
         2)聚合酶浓度:推荐使用1 U/50 μL。可以在0.5-2 U/50 μL之间进行优化;
         3)Mg2+终浓度:体系终浓度为1.5 mM。如有特殊需要,可用50 mM MgCl2,以0.2-0.5 mM为间隔向上摸索;
         4)高GC模板:在体系中加入终浓度为3%的DMSO可能有利于扩增。


    2、PCR扩增程序

    表2 PCR扩增反应程序

    步骤

    温度

    时间

    循环数

    预变性

    98°C

    1 min

    1

    变性

    98°C

    10 sec

    1~15(根据实验要求)

    退火

    60°C

    30 sec

    延伸

    72°C

    30 sec

    终延伸

    72°C

    5 min

    1

    Hold

    4°C

    Hold

    -


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    产品名称

    产品货号

    规格

    价格(元)

     Hieff Canace® High-Fidelity DNA polymerase

    10135ES60/76/80

    100/500/1000 U

    626/2356/4256

     Hieff Canace® II Uracil High-Fidelity DNA polymerase

    10144ES60/76

    100/500 U

    393/1993

    HB181206