Cas9 Nuclease来源于野生型酿脓链球菌S. pyogenes，是依赖RNA介导的内切核酸酶，可以特异地切割双链DNA（在DNA PAM存在的情况下，也可以切割单链DNA或单链RNA）。Cas9切割位点位于目标序列（target sequence）内，离PAM（NGG）区3个碱基。本产品经过密码子优化及核定位信号（NLS）设计，由大肠杆菌重组表达而来，编辑效率高，可用于细胞（造血干细胞、T细胞等）的基因修饰，也可用于分子诊断，检测病原体等。

• 浓度：10-12 mg/mL；
• 纯度：≥ 95 % ；
• 内切酶、外切酶、RNase、磷酸酶阴性；
• E. coli宿主DNA残留< 3 ng/mL
• E. coli宿主蛋白质残留< 0.1 ppm
• 细菌内毒素< 10 EU/mg
• 支原体检测：阴性

A：体外切割测试：3批次体外切割活性均达98%以上。

B：体内基因敲除，敲除效率与进口品牌一致。

图1. Cas9 Nuclease体外切割活性及基因敲除效率结果

-25~-15℃储存，有效期1年。

Q：使用14701ES时候，如何设计单导向RNA（sgRNA）？

A：本产品来源于野生型酿脓链球菌S.pyogenes。单导向RNA（sgRNA）骨架可使用

5’-NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNGUUUUAGAGCUAUGCUGAAAGCAUAGCAAGUUAAAAUAAGGCUAGUCCGUUAUCAACUUGAAAAAGUGGCACCGAGUCGGUG -3’

"N"代表与DNA靶标序列特异性结合的20个核苷酸序列。

推荐购买翌圣货号11355ES的sgRNA合成试剂盒，产量高。只需根据目标区域设计，纯化后的sgRNA产物可搭配14701使用。