干货分享|ATP Luminescent 细胞活力检测试剂盒的应用
在生物化学中，三磷酸腺苷(三磷酸腺甙，英文名：Adenosine triphosphate, ATP)是一种核苷酸，作为细胞内能量传递的“分子通货”，储存和传递化学能。ATP在核酸合成中也具有重要作用。
图1.ATP的分子结构
如何快速精确的检测细胞活力，科研人员一直在探寻新的检测手段。ATP 可以用来衡量细胞新陈代谢水平并与活细胞数目具有良好的线性关系，可通过ATP 含量反应活细胞的数目。ATP Luminescent 细胞活力检测试剂盒是借助ATP 依赖的荧光素酶催化的荧光素发光反应，通过化学发光信号测定细胞内ATP 含量，从而检测细胞活力或定量检测活细胞数目并且具有灵敏度高、线性范围宽，适合高通量筛选检测。
图2.ATP Luminescent检测原理图
方法对比
表1.不同细胞活力检测方法的优劣对比
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方法 |
甲䐶水溶性 |
灵敏度 |
检测时间 |
检测指标 |
细胞毒性 |
试剂稳定性 |
高通量检测 |
使用便捷度 |
|
MTT法 |
差 |
＋＋ |
较长 |
A560-600nm |
高，细胞形态消失 |
＋ |
＋＋ |
＋ |
|
WST-1法 |
好 |
＋＋＋ |
较短 |
A420-480nm |
低，细胞形态不变 |
＋＋＋＋ |
＋＋＋＋ |
＋＋＋ |
|
CCK-8法 |
好 |
＋＋＋ |
较短 |
A420-480nm |
低，细胞形态不变 |
＋＋＋＋＋ |
＋＋＋＋ |
＋＋＋＋ |
|
Calcein AM法 |
不涉及 |
＋＋＋＋ |
很短 |
荧光 |
低，细胞形态不变 |
＋＋＋＋ |
＋＋＋＋ |
＋＋＋＋＋ |
|
EdU法 |
不涉及 |
＋＋＋＋＋ |
较短 |
荧光 |
细胞被固定 |
＋＋＋＋ |
＋＋＋ |
＋＋ |
|
ATP酶法 |
不涉及 |
＋＋＋＋＋ |
极短 |
化学发光 |
细胞被裂解 |
＋＋＋＋ |
＋＋＋＋＋ |
＋＋＋＋＋ |
产品应用
图3.ATP Luminescent 细胞活力检测试剂盒的应用类型
产品特点
01
将试剂与待测样品按照同体积混合反应10min即可上机检测，无需洗涤换液等步骤。
图4.ATP Luminescent试剂盒检测流程图
02
能在10~10万个细胞范围内测定并呈现良好的线性关系。下图是Yeasen产品与国外竞品公司同类产品对比测试。
a.线性测试
图5.对由低到高不同细胞数及不同细胞类型，均展现出极优的线性度
b.信号强度测试
图6.对于不同的检测时间，荧光信号均强于国外竞品公司。信号稳定性也更好
03
反复冻融5次对检测效果基本无影响、4℃保存3天对检测效果无显著影响、室温保存1天，仍可保留80%以上的检测效果、本产品即使仅保留约50%的检测效果，仍可以满足各种常规检测。
FAQ
Q1：ATP的细胞活力检测试剂，可以在荧光显微镜下观察拍照吗？
A1：不可以，该试剂盒的检测原理是化学发光法。
Q2：那换算成ATP浓度大概是多少呢？
A2：这个不能直接换算，需要客户自己去做标准曲线才能知道，客户测出来的是发光值。
Q3: 试剂盒可以检测ATP的量吗？是否有标准品？
A3: 是检测活细胞类ATP的量，用酶标仪测发光值，没有标准品。
Q4: 这个只能用于96孔板吗？大孔板裂解后转移到96孔里测可以吗？效果会不会有差别?
A4: 这个试剂加样量和细胞悬液加样量是1比1的，换成大孔版注意调整试剂加样量就好了，转移不会有影响。
客户已发表文献
[1] Guoping Mao, Dedong Xin, Qian Wang, Dongmei Lai. Sodium molybdate inhibits the growth of ovarian cancer cells via inducing both ferroptosis and apoptosis. Free Radical Biology and Medicine,Volume 182,2022,Pages 79-92,ISSN 0891-5849.[2] Yiqing Zou, Xiaonan Chen, Yingying Sun, Pengyu Li, Mao Xu, Pengchao Fang, Shuqi Zhang, Gang Yuan, Xin Deng, Haiyan Hu.Antibiotics-free nanoparticles eradicate Helicobacter pylori biofilms and intracellular bacteria.Journal of Controlled Release,Volume 348,2022,Pages 370-385,ISSN 0168-3659.
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产品名称 |
产品编号 |
规格 |
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ATP Luminescent Cell Viability Assay KitATP Luminescent 细胞活力检测试剂盒 |
40210ES10 |
10 mL |
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40210ES60 |
100 mL |
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40210ES80 |
10×100 mL |
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